"МУК 4.2.2870-11. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней. Методические указания" // Портал о здоровье, заболеваниях и лечении, о лекарствах, о докторах и больницах.

Утверждаю

Руководитель Федеральной службы

по надзору в сфере защиты

прав потребителей

и благополучия человека,

Главный государственный

санитарный врач

Российской Федерации

Г.Г.ОНИЩЕНКО

25 мая 2011 г.

Дата введения: 1 июня 2011 г.

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.

БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ПОРЯДОК

ОРГАНИЗАЦИИ И ПРОВЕДЕНИЯ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

ДЛЯ ЛАБОРАТОРИЙ ТЕРРИТОРИАЛЬНОГО, РЕГИОНАЛЬНОГО

И ФЕДЕРАЛЬНОГО УРОВНЕЙ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

МУК 4.2.2870-11

1. Разработаны Федеральным казенным учреждением здравоохранения "Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт" Роспотребнадзора (Ю.М.Ломов, Э.А.Москвитина, Н.Р.Телесманич, В.Д.Кругликов, И.Я.Черепахина, В.В.Балахнова, И.В.Архангельская); Федеральным казенным учреждением здравоохранения "Российский научно-исследовательский противочумный институт "Микроб" Роспотребнадзора (В.В.Кутырев, Е.С.Казакова, И.Н.Шарова, Н.А.Осина, С.А.Щербакова, Н.И.Смирнова); Федеральным казенным учреждением здравоохранения "Иркутский научно-исследовательский противочумный институт" Роспотребнадзора (С.В.Балахонов, Л.Я.Урбанович, Л.В.Миронова, Е.С.Куликалова, А.С.Кожевникова); Федеральным казенным учреждением здравоохранения "Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт" Роспотребнадзора (В.Н.Савельев); Федеральным казенным учреждением здравоохранения "Противочумный центр" Роспотребнадзора (В.Е.Безсмертный, С.М.Иванова); Федеральным бюджетным учреждением здравоохранения "Федеральный центр гигиены и эпидемиологии" Роспотребнадзора (В.Г.Сенникова, М.В.Зароченцев, В.В.Мордвинова); Федеральным государственным учреждением науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии Роспотребнадзора (И.А.Дятлов, С.Ф.Бикетов, Е.И.Баранова, М.В.Храмов, Е.А.Тюрин); Федеральным государственным бюджетным учреждением "ГИСК им. Л.А.Тарасевича" Минздравсоцразвития (И.В.Борисевич, Л.В.Саяпина).

2. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 25 мая 2011 г. и введены в действие с 1 июня 2011 г.

3. Введены впервые.

1. Область применения

1.1. Настоящие методические указания определяют порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней, формы и методы их взаимодействия, номенклатуру и объем исследования, требования к лабораториям, специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований, материально-техническому обеспечению исследований, биологической безопасности проведения работ.

1.2. Настоящие методические указания предназначены для специалистов органов и учреждений, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор в Российской Федерации, специалистов противочумных учреждений, органов управления здравоохранением и лечебно-профилактических учреждений.

2. Нормативные ссылки

2.1. Федеральный закон от 30.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".

2.2. Постановление Правительства Российской Федерации от 29.10.2007 N 720 "О внесении изменений в п. 5 Положения о лицензировании деятельности, связанной с использованием возбудителей инфекционных заболеваний, утвержденного Постановлением Правительства Российской Федерации от 22.01.2007 N 31".

2.3. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 24.02.2009 N 11 "О представлении внеочередных донесений о чрезвычайных ситуациях в области общественного здравоохранения санитарно-эпидемиологического характера" (зарегистрировано в Минюсте РФ 10.04.2009 N 13745).

2.4. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 07.07.2009 N 415н "Об утверждении квалификационных требований к специалистам с высшим и послевузовским медицинским и фармацевтическим образованием в сфере здравоохранения" (зарегистрирован в Минюсте РФ 09.07.2009 N 14292).

2.5. Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 17.03.2008 N 88 "О мерах по совершенствованию мониторинга за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней".

2.6. Санитарные правила "Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности". СП 1.2.036-95 (утв. Постановлением Госкомсанэпиднадзора РФ от 28.08.1995 N 14).

2.7. Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы "Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами". СанПиН 2.1.7.2790-10 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 09.12.2010 N 163. Зарегистрировано в Минюсте РФ 17.02.2011 N 19871).

2.8. Санитарно-эпидемиологические правила "Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)". СП 1.3.1285-03 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 15.04.2003 N 42 "О введении в действие санитарно-эпидемиологических правил СП 1.3.1285-03". Зарегистрировано в Минюсте РФ 10.05.2003 N 4545).

2.9. Санитарно-эпидемиологические правила "Порядок выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами". СП 1.3.1318-03 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 30.04.2003 N 85 "О введении в действие санитарно-эпидемиологических правил СП 1.2.1318-03". Зарегистрировано в Минюсте РФ 19.05.2003 N 4558).

2.10. Санитарно-эпидемиологические правила "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней". СП 1.3.2322-08 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 28.01.2008 N 4 "Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил СП 1.3.2322-08". Зарегистрировано в Минюсте РФ 21.02.2008 N 11197).

2.11. Санитарно-эпидемиологические правила "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней". Дополнения и изменения N 1 к СП 1.3.2322-08". СП 1.3.2518-09 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 02.06.2009 N 42. Зарегистрировано в Минюсте РФ 08.07.2009 N 14280).

2.12. Санитарно-эпидемиологические правила "Санитарная охрана территории Российской Федерации". СП 3.4.2318-08 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 22.01.2008 N 3 "Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил СП 3.4.2318-08". Зарегистрировано в Минюсте РФ 03.04.2008 N 11459).

2.13. Санитарно-эпидемиологические правила "Профилактика холеры. Общие требования к эпидемиологическому надзору за холерой на территории Российской Федерации". СП 3.1.1.2521-09 (утв. Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 09.06.2009 N 43 "Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил СП 3.1.1.2521-09". Зарегистрировано в Минюсте РФ 09.07.2009 N 14285).

2.14. Методические указания "Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности": МУ 1.3.2569-09.

2.15. Методические указания "Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии": МУ 3.3.2.2124-06.

2.16. Методические указания "Лабораторная диагностика холеры": МУК 4.2.2218-07.

2.17. Методические указания "Профилактика холеры. Организационные мероприятия. Оценка противоэпидемической готовности медицинских учреждений к проведению мероприятий на случай возникновения очага холеры": МУ 3.1.1.2232-07.

2.18. Методические указания "Определение чувствительности возбудителей опасных бактериальных инфекций (чумы, сибирской язвы, холеры, туляремии, бруцеллеза, сапа и мелиоидоза) к антибактериальным препаратам": МУК 4.2.2495-09.

2.19. Методические указания "Методы контроля бактериологических питательных сред": МУК 4.2.2316-08.

2.20. Методические указания "Серологические методы в диагностике холеры": МУК 4.2.2315-08. Дополнения к МУК 4.2.2218-07 "Лабораторная диагностика холеры".

3. Перечень сокращений

АБП - антибактериальные препараты

ИФА - иммуноферментный анализ

ЛПУ - лечебно-профилактическое учреждение

МУ - методические указания

МУК - методические указания по контролю

МФА - метод флуоресцирующих антител

ООИ - особо опасные инфекции

ПБА - патогенный биологический агент

ПЦР - полимеразная цепная реакция

ПЧС - противочумная станция

РАО - реакция агломерации объемная

РА - реакция агглютинации

РИВ - реакция иммобилизации вибрионов

РВА - реакция вибриоцидных антител

СанПиН - санитарные правила и нормативы

СП - санитарные правила

ИХ-тест - иммунохроматографический тест

4. Общие положения

Характеристика болезни и возбудителя холеры

Холера - особо опасная инфекционная болезнь с диарейным синдромом, фекально-оральным механизмом передачи возбудителя инфекции, водным, пищевым и контактным путями распространения.

Возбудитель холеры - холерный вибрион относится к семейству Vibrionaceae, роду Vibrio и виду Vibrio cholerae.

К виду Vibrio cholerae отнесены грамотрицательные, аспорогенные, полиморфные, слегка изогнутые или прямые палочки длиной 1,5-3,0 мкм и шириной 0,2-0,6 мкм, с одним полярно расположенным жгутиком, который длиннее тела клетки в 2-3 раза.

Холерные вибрионы быстро размножаются в 1%-й пептонной воде, образуя через 6-8 ч на поверхности среды нежную пленку. Через 24 ч роста пленка становится грубой, среда слабо мутнеет. На поверхности плотного питательного агара (щелочной агар, pH 8,0) через 18-24 ч инкубации рост холерных вибрионов проявляется в формировании крупных (2-3 мм), гладких, прозрачных колоний с ровным краем, которые легко эмульгируются в физиологическом растворе. В косо проходящем свете они отсвечивают голубоватым цветом. На элективной среде TCBS на зеленом фоне среды колонии вибрионов круглые, гладкие с ровным краем, плоские, желтого цвета. При более длительной инкубации желтый цвет колоний часто переходит в зеленый цвет.

Холерные вибрионы образуют индофенолоксидазу - тест дифференциации от представителей семейства Enterobacteriaceae, ферментируют глюкозу в аэробных и анаэробных условиях до кислоты без газа - тест дифференциации от представителей родов Pseudomonadaceae, декарбоксилируют лизин и орнитин, но не дигидролизуют аргинин - тесты дифференциации от представителей других семейств (Aeromonas spp., Plesiomonas spp., Enhydrobacter spp., Photobacterium spp.) и отдельных видов рода Vibrio.

Помимо этого, холерные вибрионы расщепляют до кислоты без газа сахарозу, маннозу, крахмал, маннит, не расщепляют арабинозу, салицин, дульцит, инозит. В отдельных случаях ферментацию маннозы холерными вибрионами возможно определить только в анаэробных условиях. Холерные вибрионы восстанавливают нитраты в нитриты, образуют индол, разжижают желатину, продуцируют нейраминидазу, лецитиназу, триглицероллипазу.

V. cholerae по наличию специфического O-антигена распределяются на серологические группы. В настоящее время известно 206 серологических O групп холерных вибрионов. Возбудителями холеры являются холерные вибрионы O1 и O139 серологических групп. Холерные вибрионы других не O1/не O139 серологических групп могут вызывать спорадические или групповые случаи диарей, не склонные к эпидемическому распространению.

Холерные вибрионы O1 серогруппы по различиям в полисахаридном компоненте O-антигена делятся на три серовара: Огава, Инаба и Гикошима. Серовар Гикошима не стабилен и реверсирует в один из основных сероваров, преимущественно - Огава. Известен R-антиген холерных вибрионов, описаны штаммы, агглютинирующиеся RO сывороткой и не агглютинирующиеся сыворотками O1, Огава или Инаба.

У холерных вибрионов имеется общий жгутиковый H-антиген.

Холерные вибрионы в пределах O1 серогруппы делятся на два биовара: классический и эльтор, имеющие существенные фенотипические и генетические отличия. Деление на биовары основывается на чувствительности к холерным диагностическим бактериофагам - классическому и эльтор, чувствительности к 50 ед./мл полимиксина B, агглютинации куриных эритроцитов, образовании ацетилметилкарбинола в реакции Фогес-Проскауэра.

Холерные вибрионы являются носителями умеренных фагов с низкой

литической активностью. Известны фаги, активные в отношении холерных

вибрионов O1 и не O1, включая O139 серологическую группу, а также с более

узким спектром литического действия, в пределах отдельных групп штаммов,

+ -

например ctx и ctx холерных вибрионов.

Одним из основных факторов вирулентности (и эпидемической значимости) холерных вибрионов, определяющих тяжесть клинической картины при холере, является холерный энтеротоксин или СТ (от англ. - cholera toxin), синтез которого контролируется кластером генов ctxAB.

Описан ряд дополнительных токсинов: Zot и Ace токсины, цитотоксический комплекс RTX, цитототонический фактор Cef, термостабильный токсин ST, NMDCY токсин, шигаподобный токсин Slt, WO7 токсин, cholix toxin. Не менее важным фактором вирулентности холерных вибрионов являются токсин-корегулируемые пили адгезии или TCP (от англ. - toxin-coregulated pilus) - ключевой фактор колонизации. За синтез пилей TCP отвечают гены tcpA-F, среди них ген tcpA - за биосинтез основной субъединицы пилей.

Нетоксигенные штаммы холерных вибрионов обладают гемолитической активностью, которая включает активность нескольких компонентов: рициноподобного галактозоспецифичного лектина (hlyA) и комплекса ферментов гидролаз, ведущим из которых является липаза (lipA). Гемолитическая активность является ведущим фактором патогенности у штаммов возбудителей холеры O1 и O139 серогрупп, не имеющих ген холерного токсина. Такие штаммы могут вызывать спорадические случаи диареи различной степени тяжести, но не склонны к широкому распространению. Способность к гемолизу эритроцитов барана в тесте Грейга, коррелирующая с липазной активностью, является визуализированным тестом, свидетельствующим о том, что штамм не может вызывать тяжелую клиническую картину холеры и не способен к широкому эпидемическому распространению.

Понятие эпидемической значимости базируется на определении комплекса показателей:

- прямые - выявление гена холерного токсина в ПЦР и определение активности его продукции на кроликах-сосунках;

- косвенные - отсутствие гемолитической, липазной активности, поздняя ферментация маннита, высокая адгезивная активность in vitro (на модели эритроцитов).

Холерные вибрионы имеют две хромосомы: первую (или большую размером 2 960 т.п.н.) и вторую (или малую размером 1 070 т.п.н.). На большой хромосоме V. cholerae расположены гены патогенности: ctxAB, кодирующий биосинтез CT, гены, определяющие продукцию дополнительных холерных токсинов, гены tcpA-F, кодирующие продукцию TCP, а также гены, необходимые для репликации, транскрипции, репарации ДНК, биосинтеза клеточной стенки и O-антигена. Биосинтез O1 антигена определяет кластер генов, обозначенный как wbe. Продукция O139 антигена кодируется кластером генов, также локализованном на большой хромосоме и имеющим обозначение wbf. Выявление с помощью ПЦР генов wbe и wbf, специфичных для холерных вибрионов O1 и O139 серологических групп, позволяет определить серогруппу возбудителя холеры. На малой хромосоме, помимо генов с неустановленной функцией, локализованы структурные гены hlyA, отвечающие за синтез термолабильного гемолизина, а также остров интегронов, содержащий гены, кодирующие антибиотикоустойчивость, и участвующий в приобретении новых генов. Следует отметить, что ген hlyA присутствует в хромосоме всех штаммов V. cholerae, как способных к биосинтезу термолабильного гемолизина, так и не продуцирующих этот белок. Однако в гене hlyA холерных вибрионов классического биовара, в отличие от такового V. cholerae эльтор, имеется делеция протяженностью 11 п.н., вследствие чего продукция гемолизина вибрионами этого биовара невозможна.

Штаммы холерных вибрионов O1 и O139 серогрупп, содержащие гены ctxAB и tcpA-F, вызывают холеру и являются эпидзначимыми. Эти штаммы не лизируют эритроциты барана в пробе Грейга. Эпидемически не значимые штаммы холерных вибрионов, не содержащие генов ctxAB и tcpA-F, лизируют эритроциты барана в пробе Грейга. Нетоксигенные (не содержащие гена холерного токсина) ctxAB варианты холерных вибрионов O1, также как и других серогрупп могут вызывать спорадические (единичные) или групповые (при общем источнике инфицирования) заболевания, не склонные к эпидемическому распространению.

Известна изменчивость холерных вибрионов по морфологии колоний и клеток, по образованию некультивируемых и Л-форм, по агглютинабельности диагностическими O, Инаба и Огава сыворотками (вплоть до полной утраты) и агглютинабельности RO сывороткой. Нередко сочетается изменчивость по культурально-морфологическим признакам, агглютинабельности холерными сыворотками и чувствительности к фагам.

Холерные вибрионы O1 и O139 серогрупп, как правило, чувствительны к набору антибактериальных препаратов. Однако широкое применение антибактериальных препаратов в очагах холеры способствовало увеличению резистентности холерных вибрионов к ним.

При проведении лабораторной диагностики холеры регламентируется использование зарегистрированных диагностических препаратов и тест-систем в соответствии с прилож. 4, позволяющих выявлять определенные фено- и генотипические признаки холерных вибрионов.

5. Порядок организации и проведения лабораторной

диагностики холеры для лабораторий территориального уровня

5.1. Порядок организации и проведения

лабораторной диагностики холеры для лабораторий

лечебно-профилактических учреждений

5.1.1. Требования к бактериологическим лабораториям

лечебно-профилактических учреждений, осуществляющим

диагностические исследования на холеру

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов

Лечебно-профилактические учреждения, лаборатории которых осуществляют диагностические исследования на холеру, должны иметь лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей III-IV групп патогенности (опасности).

Лаборатории ЛПУ должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами.

Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных культур холерных вибрионов (подозрительных) должны осуществляться в соответствии с действующими нормативными документами о порядке учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по сбору, хранению и удалению отходов лечебно-профилактических учреждений.

Проведение исследований на всех этапах: отбор проб, их хранение, доставка в лабораторию, регистрация, порядок исследования, выдача результатов, взаимодействие с учреждениями Роспотребнадзора должны соответствовать требованиям действующих нормативных и распорядительных документов.

Требования к специалистам и вспомогательному персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру

Исследования на холеру могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие соответствующие курсы по специальности "Бактериология", имеющие допуск к работе с ПБА III-IV групп на основании приказа руководителя учреждения.

Специалисты должны повышать квалификацию не реже одного раза в пять лет и иметь сертификат специалиста.

Инженерно-технический персонал, дезинфекторы и санитарки проходят специальную подготовку по месту работы в соответствии с должностными обязанностями.

Необходимый уровень подготовки специалистов с высшим медицинским (биологическим) образованием и средним медицинским образованием, повышение их квалификации по лабораторной диагностике холеры представлен в прилож. 1.

Требования к знаниям и умениям специалистов ЛПУ, выполняющих бактериологические исследования на холеру, приведены в прилож. 2.

Требования к обеспечению безопасности работы персонала

Каждая бактериологическая лаборатория должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю соблюдения требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале.

Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным или зараженным возбудителями инфекционных болезней III-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими нормативными документами.

Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований

Контроль качества диагностических исследований на холеру в лабораториях ЛПУ включает:

- контроль качества питательных сред, диагностических препаратов, дистиллированной воды, химических реактивов и дезинфицирующих средств;

- своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования;

- контроль качества стерилизации лабораторной посуды;

- контроль работы паровых и суховоздушных стерилизаторов;

- контроль работы бактерицидных ламп;

- контроль температурного режима работы холодильников и термостатов;

- проверка состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности;

- проверка санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроль смывов с поверхностей и оборудования.

Результаты контроля фиксируют в специальных журналах.

Правила ведения документации

Ведение лабораторной документации, включая регистрационные и рабочие журналы, осуществляют в соответствии с требованиями действующих нормативно-методических документов.

Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру

Для проведения диагностических исследований на холеру в лабораториях ЛПУ должны быть в наличии:

- питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 3, 8);

- диагностические препараты, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 4, 8);

- химические реактивы (прилож. 5);

- приборы, оборудование, расходные материалы (прилож. 6).

5.1.2. Номенклатура и объем исследований

В лабораториях ЛПУ проводят диагностические исследования материала от лиц, подлежащих обследованию на холеру при проведении эпидемиологического надзора в соответствии с требованиями действующих санитарных правил по профилактике холеры, в периоды обследования дифференцированно для территорий, различных по типам эпидемических проявлений холеры.

В лабораториях ЛПУ проводят диагностические исследования материала в следующем объеме:

1) посев на среды накопления и дифференциально-диагностические, выделение культуры, подозрительной на холерный вибрион по морфологическим признакам;

2) идентификация культуры, подозрительной на холерный вибрион, по следующим тестам:

- ферментация на полиуглеводной среде;

- определение индофенолоксидазы;

- микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

- слайд-агглютинация с холерными диагностическими сыворотками;

3) экспресс и ускоренная диагностика: методы МФА и РИВ (при исследовании материала с подозрением на холеру).

5.1.3. Порядок лабораторной диагностики холеры

в лабораториях лечебно-профилактических учреждений

Отбор и транспортировка проб клинического материала

При проведении бактериологического анализа на холеру исследуется клинический материал: испражнения, рвотные массы, желчь и секционный материл от умерших, причиной смерти которых явились кишечные инфекции неустановленной этиологии.

Отбор, упаковка и транспортирование проб клинического материала для исследования осуществляются в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.

Материал от больных забирает медицинский персонал ЛПУ немедленно при выявлении больного, до начала лечения антибиотиками. Кратность отбора проб - в соответствии с действующими санитарно-эпидемиологическими правилами по эпидемиологическому надзору за холерой.

В зависимости от времени забора материала и времени работы лаборатории пробы на исследование отбирают в соответствии со следующей схемой:

1. При круглосуточном режиме работы лаборатории материал забирают в нативном виде, в 5-10 мл 1%-й пептонной воды pH 8,4 +/- 0,1 (транспортная среда) или в 50 мл 1%-й пептонной воды pH 8,4 +/- 0,1 (1-я среда накопления).

2. При односменной работе лаборатории:

а) при взятии материала в 6.00-10.00 ч утра и доставке в бактериологическую лабораторию до 10 ч утра материал забирают в 5-10 мл 1%-й пептонной воды (транспортная среда) или в 50 мл 1%-й пептонной воды (1-я среда накопления);

б) при взятии материала после 10 ч утра и доставке в течение рабочего дня лаборатории материал забирают в 5-10 мл 1%-й пептонной воды (транспортная среда);

в) при взятии материала по окончании рабочего дня лаборатории и доставке в лабораторию до 10 ч утра следующего рабочего дня материал забирают в 5-10 мл 1%-й пептонной воды (транспортная среда);

г) при взятии материала в выходные дни лаборатории и доставке материала до 10 ч утра следующего рабочего дня материал забирают в 50 мл 1%-й пептонной воды с теллуритом калия (транспортная среда).

Флаконы и пробирки с 1%-й пептонной водой должны быть этикетированы с указанием названия среды и даты ее изготовления. При этом 1%-я пептонная вода хранится при температуре не выше (10 +/- 0,2) °C.

От больных тяжелой формой материал направляют в лабораторию нативным и в 1%-й пептонной воде. В транспортную среду вносят 1-2 мл или 1-2 г материала на 5-6 мл среды.

Обильные водянистые испражнения и рвотные массы в количестве 10-20 мл отбирают из индивидуального судна в стерильные контейнеры объемом 60-100 мл стерильными ложками или автоматической пипеткой переменного объема.

У больных легкими формами - 1-2 г испражнений собирают в стерильный контейнер объемом 60-100 мл или петлю (зонд) ректальную стерильную смачивают стерильным физиологическим раствором и вводят в прямую кишку на глубину 5-6 см. Материал помещают в пробирку с транспортной средой.

Желчь берут при дуоденальном зондировании в лечебном учреждении. В отдельные полимерные контейнеры объемом 60 мл собирают две порции: из желчного пузыря и желчных протоков (B и C). Материал доставляют нативным.

Пробы маркируют, обрабатывают снаружи дезинфицирующим раствором, упаковывают в полиэтиленовый пакет с застежкой-молнией, заполняют бланк-направление и помещают в контейнер (кейс) для транспортировки биологического материала на исследование.

При необходимости пробы сохраняют при комнатной температуре (24,0 +/- 1,0 °C) в биксе, ящике, шкафу в специально выделенной комнате, закрывающейся на замок.

Исследование клинического материала

Профилактические исследования клинического материала на холеру проводят в течение рабочего дня, диагностические исследования материала от больного с подозрением на холеру, а также в случае выделения культуры, подозрительной на холерный вибрион - в условиях круглосуточного режима работы лаборатории с включением экспресс и ускоренных методов диагностики. При исследовании материала от больных холерой (подозрительных) среды накопления с ингибиторами не используются.

Методы исследования клинического материала на холеру в лабораториях ЛПУ: бактериологический и ускоренные (слайд-агглютинация, РИВ и МФА).

Все изолированные от людей культуры, подозрительные на холерные вибрионы, независимо от результатов слайд-агглютинации холерными сыворотками, передаются для дальнейшей идентификации в установленном порядке.

1. Исследование клинического материала на холеру при круглосуточном режиме работы лаборатории

I этап исследования

Посев нативного материала (испражнения, рвотные массы и др.) и материала, доставленного в транспортной среде, в первую жидкую среду накопления (1%-ю пептонную воду) и на плотные питательные среды: щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

Материал, доставленный в 5 мл 1%-й пептонной воды, полностью засевают в 50 мл среды накопления.

При доставке материала в 50 мл 1%-й пептонной воды не позже 2 ч после забора пробу помещают в термостат на 6 ч (первая среда накопления). При доставке в более поздние сроки 5 мл материала засевают в 50 мл 1%-й пептонной воды.

Материал от лиц, принимавших антибиотики, активные по отношению к возбудителю холеры, засевают в большой объем жидкой накопительной среды (200-300 мл) и на 2 чашки щелочного агара. Посевы инкубируют при 37 °C в течение 24 ч, производя высев через каждые 8-10 ч на пластинки щелочного агара. Вторую среду накопления при этом не используют.

Постановка ускоренных методов исследования с нативным материалом: МФА и РИВ.

При получении положительного результата в двух методах выдают устный предварительный положительный ответ по предусмотренной в учреждении схеме, в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.

II этап исследования

(через 6-8 ч от начала исследования)

Высев с первой среды накопления на щелочной агар, элективную среду и во вторую среду накопления (1%-ю пептонную воду).

Постановка ускоренных методов исследования с материалом из I среды накопления при отрицательных результатах в МФА и РИВ на I этапе исследования.

Выдача устного предварительного положительного ответа при положительном результате в двух методах по предусмотренной схеме.

III этап исследования

(через 12-16 ч от начала исследования)

Высев из второй среды накопления на щелочной агар.

Просмотр посевов на щелочном агаре, засеянных на I этапе исследования, в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа.

Производят отбор подозрительных колоний на полиуглеводную среду и щелочной или другой питательный агар для накопления культур.

При наличии достаточного количества подозрительных колоний ставят следующие тесты:

- определение индофенолоксидазы;

- микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

- слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате - с Инаба, Огава), RO, при отрицательном результате - с сывороткой O139 серогруппы;

- постановка МФА, РИВ.

Выдача устного предварительного положительного ответа при положительном результате в двух методах (наличие индофенолоксидазы, положительный результат слайд-агглютинации, МФА или РИВ) по предусмотренной схеме.

IV этап исследования

(через 18-24 ч от начала исследования)

Просмотр посевов на щелочном агаре и на элективной среде, сделанных на I-II этапах исследования в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа.

Отбор колоний, подозрительных на колонии холерных вибрионов, постановка тестов, предусмотренных на III этапе исследования.

Отсев подозрительных на холерные вибрионы колоний на одну из полиуглеводных сред и щелочной агар для накопления культуры.

Выдача устного предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы на основании результатов следующих тестов:

- характерные морфологические и культуральные признаки;

- положительный тест на индофенолоксидазу;

- положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками;

- положительные результаты ускоренной диагностики методами МФА и РИВ.

V этап исследования

(через 24-36 ч от начала исследования)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре, постановка тестов, предусмотренных на III этапе исследования.

- характерные морфологические и культуральные признаки;

- положительный тест на индофенолоксидазу;

- положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками;

- положительные результаты ускоренной диагностики методами МФА и РИВ.

Подготовка выделенной культуры к транспортированию.

Передача выделенной культуры для идентификации в установленном порядке.

2. Исследование клинического материала на холеру при односменной работе лаборатории

В течение рабочей недели для отбора проб используют 1%-ю пептонную воду без теллурита калия в объеме 5-10 мл (транспортная среда) или 50 мл (среда накопления).

В качестве 1-й или 2-й среды накопления используют 1%-ю пептонную воду (pH 8,4 +/- 0,1) с теллуритом калия в конечной концентрации 1:100 000 - 1:200 000 в соответствии с результатами его контроля.

1-й вариант. Клинический материал поступил в лабораторию до 10 ч утра. Время взятия материала - 6.00-10.00 ч утра.

I этап исследования

а) материал доставлен в транспортной среде (5-10 мл 1%-й пептонной воды) или нативным (испражнения, рвотные массы и др.).

Посев материала в 50 мл 1%-й пептонной воды - 1-я среда накопления. Кроме того, нативный материал засевают на плотные питательные среды: щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

б) материал доставлен не позже 2 ч после забора в 50 мл 1%-й пептонной воды. Помещают в термостат на инкубацию как 1-ю среду накопления.

II этап исследования

через 6 ч (в течение 1-го рабочего дня)

Пересев с 1-й среды накопления во 2-ю среду накопления с теллуритом калия и высев на щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

III этап исследования

через 24-26 ч от начала исследования (в начале 2-го

рабочего дня)

Высев со 2-й среды накопления на щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

Просмотр посевов на щелочном агаре и элективной среде, засеянных на I и II этапах исследования, в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа.

Отсев колоний, подозрительных на колонии холерных вибрионов, на одну из полиуглеводных сред и щелочной агар для накопления культуры.

При достаточном количестве подозрительные на холерные вибрионы колонии изучают с использованием следующих тестов:

- определение индофенолоксидазы;

- микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

- слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате - с Инаба, Огава), RO и O139 серогруппы.

- характерные морфологические и культуральные признаки;

- положительный тест на индофенолоксидазу;

- положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками.

IV этап исследования

через 48-50 ч от начала исследования (в течение 3-го

рабочего дня)

Просмотр посевов на щелочном агаре и элективной среде, сделанных на I-III этапах исследования, в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа.

Отбор со щелочного агара и элективной среды подозрительных на холерные вибрионы колоний на одну из полиуглеводных сред и щелочной агар для накопления культуры.

Подозрительные на холерные вибрионы колонии изучают с использованием следующих тестов:

- определение индофенолоксидазы;

- микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

Выдача предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы на основании результатов следующих тестов:

- характерные морфологические и культуральные признаки;

- положительный тест на индофенолоксидазу;

- положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками.

V этап исследования

через 72-74 ч (в течение 4-го рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре и изучение их по тестам, указанным для IV этапа исследования.

Подготовка выделенной культуры к транспортированию. Передача выделенной культуры для дальнейшей идентификации в установленном порядке возможна на любом этапе.

2-й вариант. Клинический материал поступил после 10 ч утра, в течение рабочего дня лаборатории. Время взятия материала - 10.00 - до конца рабочего дня лаборатории.

Материал доставлен в транспортной среде (5-10 мл 1%-й пептонной воды).

I этап исследования

(в течение 1-го рабочего дня)

Посев 5-10 мл транспортной среды с материалом в 50 мл 1%-й пептонной воды с теллуритом калия - 1-я среда накопления и высев на щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

II этап исследования

через 24-26 ч от начала исследования (в начале 2-го

рабочего дня)

Высев с 1-й среды накопления во 2-ю среду накопления без теллурита калия, на щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

Просмотр в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа посевов на щелочном агаре и элективной среде, сделанных на I этапе исследования.

Отсев подозрительных на холерные вибрионы колоний на полиуглеводную среду и щелочной или другой питательный агар для накопления культуры.

Подозрительные на холерные вибрионы колонии изучают с использованием следующих тестов:

- определение индофенолоксидазы;

- микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

Выдача предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы, на основании результатов следующих тестов:

- характерные морфологические и культуральные признаки;

- положительный тест на индофенолоксидазу;

- положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками.

III этап исследования

через 30-32 ч от начала исследования (в конце 2-го

рабочего дня)

Высев через 6 ч инкубации со 2-й среды накопления на щелочной агар.

IV этап исследования

через 48-50 ч от начала исследования (в течение 3-го

рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре, постановка тестов, предусмотренных на II этапе исследования.

Просмотр в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа посевов на щелочном агаре и элективной среде, сделанных на II и III этапах исследования.

Подозрительные на холерные вибрионы колонии изучают с использованием следующих тестов:

- определение индофенолоксидазы;

- микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

Выдача устного предварительного положительного ответа об обнаружении в исследуемом материале культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы, на основании результатов следующих тестов:

- характерные морфологические и культуральные признаки;

- положительный тест на индофенолоксидазу;

- положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками.

V этап исследования

через 72-74 ч (в течение 4-го рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре.

Изучение по тестам, предусмотренным на IV этапе.

3-й вариант. Время взятия материала - по окончании рабочего дня лаборатории. Клинический материал доставлен в лабораторию до 10 ч утра следующего рабочего дня.

I этап исследования (1-й рабочий день)

Материал доставлен в транспортной среде (5-10 мл 1%-й пептонной воды без теллурита калия).

Посев материала в 50 мл 1%-й пептонной воды (1-я среда накопления), на щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

II этап исследования

через 6 ч от начала исследования (в течение 1-го

рабочего дня)

Пересев с 1-й среды накопления во 2-ю среду накопления (1%-я пептонная вода с теллуритом калия), высев на щелочной агар и элективную среду типа TCBS.

III этап исследования

через 24-26 ч от начала исследования (в начале 2-го

рабочего дня)

Высев со 2-й среды накопления на щелочной агар.

Просмотр в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа посевов на щелочном агаре и элективной среде, засеянных на I и II этапах исследования.

Отсев подозрительных на холерные вибрионы колоний на полиуглеводную среду и на щелочной или другой питательный агар для накопления культуры.

Подозрительные на холерные вибрионы колонии изучают с использованием следующих тестов:

- микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

- определение индофенолоксидазы;

При положительном результате в двух методах - выдача устного предварительного положительного ответа по предусмотренной схеме.

IV этап исследования

через 48-50 ч от начала исследования (в течение 3-го

рабочего дня)

Просмотр в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа посевов на щелочном агаре и элективной среде.

Отсев на полиуглеводную среду и щелочной или другой питательный агар для накопления культуры, подозрительной на холерные вибрионы.

Определение индофенолоксидазы.

Микроскопия мазка, окрашенного по Граму.

Слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате - с Инаба, Огава), RO и O139 серогруппы.

- характерные морфологические и культуральные признаки;

- положительный тест на индофенолоксидазу;

- положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками.

V этап исследования

через 72-74 ч от начала исследования (в течение 4-го

рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре. Изучение культур по тестам предыдущего этапа.

Подготовка выделенной культуры к транспортированию.

Передача выделенной культуры для дальнейшей идентификации в установленном порядке возможна на любом этапе.

4-й вариант. Время взятия материала - выходные дни лаборатории. Клинический материал поступил до 10 ч утра следующего рабочего дня.

I этап исследования

(1-й рабочий день)

Материал доставлен в транспортной среде (50 мл 1%-й пептонной воды с теллуритом калия).

Посев 5-10 мл среды с материалом в 50 мл 1%-й пептонной воды - 1-я среда накопления.

II этап исследования

через 6 ч от начала исследования (в течение 1-го

рабочего дня)

III этап исследования

через 24-26 ч от начала исследования (в начале 2-го

рабочего дня)

Высев со 2-й среды накопления на щелочной агар.

Просмотр в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа посевов на щелочном агаре и элективной среде типа TCBS.

Отсев колоний, подозрительных на колонии холерного вибриона, на полиуглеводную среду и щелочной или другой питательный агар для накопления культуры.

При достаточном количестве подозрительных на холерные вибрионы колоний ставят тесты:

- определение индофенолоксидазы;

- микроскопия мазка, окрашенного по Грамму;

Выдача устного предварительного положительного ответа по предусмотренной схеме.

IV этап исследования

через 48-50 ч от начала исследования (в течение 3-го

рабочего дня)

Просмотр посевов в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа на щелочном агаре и на элективной среде, засеянных на II и III этапах исследования.

Отсев колоний, подозрительных на колонии холерного вибриона, на полиуглеводную среду и на щелочной или другой питательный агар для накопления культуры.

Определение индофенолоксидазы.

Микроскопия мазка, окрашенного по Граму.

Выдача предварительного положительного ответа по предусмотренной схеме.

V этап исследования

через 72-74 ч от начала исследования (в течение 4-го

рабочего дня)

Отбор культур с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре.

Изучение культуры по тестам, предусмотренным на IV этапе.

Передача выделенной культуры для дальнейшей идентификации в установленном порядке возможна на любом этапе.

5.1.4. Оформление результатов исследования

Регистрация результатов анализа в лаборатории ЛПУ производится по учетным формам в соответствии с действующими МУК по лабораторной диагностике холеры. Выдача ответов для историй болезней - по унифицированным формам.

5.1.5. Порядок взаимодействия лечебно-профилактических

учреждений с учреждениями Роспотребнадзора

Информация о выделенной в лаборатории ЛПУ культуре холерного вибриона передается в соответствии со схемой выдачи результатов исследований (прилож. 9).

Культуры холерных вибрионов направляют в лаборатории ООИ ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте, при ее отсутствии в лаборатории Регионального центра по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности или Центра индикации и диагностики опасных инфекционных болезней (территориальное противочумное учреждение). Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

5.2. Порядок организации и проведения лабораторной

диагностики холеры для филиалов ФБУЗ "Центр гигиены

и эпидемиологии" в муниципальном образовании (городе,

административном районе) в субъекте

Российской Федерации

5.2.1. Требования к лабораториям филиалов ФБУЗ

"Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании

(городе, административном районе) в субъекте Российской

Федерации, осуществляющим бактериологические

исследования на холеру

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов

ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте, на базе филиалов которого функционируют бактериологические лаборатории, должен иметь лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей III-IV групп патогенности (опасности).

Бактериологические лаборатории филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных болезней человека I-IV групп патогенности (опасности).

Лаборатории филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации.

Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных культур, подозрительных на холерные вибрионы, должны осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

Утилизация отходов должна осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по санитарно-эпидемиологическим требованиям к обращению с медицинскими отходами.

Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру

Исследования на холеру могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы по специальности "Бактериология", имеющие допуск к работе с ПБА III-IV групп на основании приказа руководителя учреждения.

Специалисты, осуществляющие деятельность, связанную с использованием возбудителей инфекционных болезней, должны повышать квалификацию не реже одного раза в 5 лет и иметь сертификат специалиста.

Необходимый уровень подготовки специалистов с высшим медицинским (биологическим) образованием и средним медицинским образованием и повышение их квалификации по лабораторной диагностике холеры представлены в прилож. 1.

Требования к знаниям и умениям специалистов, выполняющих бактериологические исследования на холеру, приведены в прилож. 2.

Требования к обеспечению безопасности работы персонала

Каждая лаборатория должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю соблюдения требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале.

Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований

Контроль качества диагностических исследований на холеру в лабораториях филиалов ФБУЗ ЦГиЭ в субъекте Российской Федерации включает:

- контроль качества питательных сред, диагностических препаратов и тест-систем, дистиллированной воды, дезинфицирующих средств, химических реактивов;

- своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования;

- контроль качества стерилизации фильтровальных установок, лабораторной посуды;

- контроль качества стерилизации паровых и суховоздушных стерилизаторов;

- контроль работы бактерицидных ламп;

- контроль температурного режима работы холодильников и термостатов;

- проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности;

- проверку санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроль смывов с поверхностей и оборудования.

Результаты контроля фиксируют в специальных журналах.

Правила ведения документации

Ведение лабораторной документации, включая регистрационные и рабочие журналы, осуществляют в соответствии с требованиями действующих методических документов.

Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру

Для проведения диагностических исследований на холеру в лабораториях должны быть в наличии:

- питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке и прошедшие контроль качества (прилож. 3, 8);

- диагностические препараты и тест-системы, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 4, 8);

- химические реактивы (прилож. 5);

- приборы, оборудование, расходные материалы (прилож. 6).

5.2.2. Номенклатура и объем исследований

Лаборатории филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации при осуществлении эпидемиологического надзора проводят плановые профилактические исследования на холеру в сроки, определенные для территорий, различных по типам эпидемических проявлений холеры, в действующих санитарных правилах:

- материала от лиц, подлежащих лабораторному обследованию;

- проб из объектов окружающей среды.

В лабораториях филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании (городе, административном районе), в субъекте проводят диагностические исследования материала в следующем объеме:

1) посев на среды накопления и дифференциально-диагностические, выделение культуры, подозрительной на возбудителя холеры;

2) идентификация культуры, подозрительной на возбудителя холеры, по следующим тестам:

- микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

- выявление индофенолоксидазы;

- слайд-агглютинация с холерными диагностическими сыворотками;

3) экспресс- и ускоренная диагностика: методы МФА и РИВ.

5.2.3. Порядок лабораторной диагностики

холеры в лабораториях филиалов ФБУЗ "Центр гигиены

и эпидемиологии" в муниципальном образовании (городе,

административном районе) в субъекте Российской Федерации

5.2.3.1. Порядок исследования клинического материала

1. Отбор проб клинического материала

При проведении бактериологического анализа на холеру исследуется клинический материал: испражнения, рвотные массы, желчь.

Отбор, упаковка проб клинического материала для исследования, транспортировка, форма направления - в соответствии с действующими МУК по лабораторной диагностике холеры.

Материал от больных с дисфункцией кишечника забирает медицинский персонал ЛПУ в соответствии с разделом 5.1.3.

2. Исследование клинического материала

Методы исследования клинического материала на холеру в лабораториях филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальных образованиях (городах и административных районах субъекта, объединенных по территориальному признаку)": бактериологический и ускоренные (слайд-агглютинация, МФА и РИВ).

Профилактические исследования клинического материала на холеру проводят в течение рабочего дня, диагностические исследования материала от больного с подозрением на холеру, а также в случае выделения культуры, подозрительной на холерный вибрион, - в условиях круглосуточного режима работы лаборатории с включением экспрессных и ускоренных методов диагностики. При исследовании материала от больных холерой (подозрительных) среды накопления с ингибиторами не используются.

Порядок исследования материала от лиц, подлежащих обследованию при эпидемиологическом надзоре за холерой, при круглосуточной работе лаборатории осуществляется в соответствии с изложенным в п. 5.1.3 (1. Исследование клинического материала на холеру при круглосуточном режиме работы лаборатории).

Порядок исследования на холеру материала от лиц, подлежащих обследованию при эпидемиологическом надзоре, при односменной работе лаборатории осуществляется в зависимости от времени забора и доставки материала в лабораторию - варианты 1-4, изложенные в п. 5.1.3 (2. Исследование клинического материала при осуществлении эпидемиологического надзора за холерой при односменной работе лаборатории).

Все изолированные от людей культуры, подозрительные на холерные вибрионы, независимо от результатов слайд-агглютинации холерными сыворотками передаются для дальнейшей идентификации в установленном порядке.

Регистрация результатов анализа и выдача ответов производится по учетным формам, предусмотренным в действующих методических указаниях по лабораторной диагностике холеры.

5.2.3.2. Порядок исследования на холеру проб из объектов окружающей среды

1. Отбор и транспортирование проб из объектов окружающей среды

Отбор и доставка для исследования проб воды из поверхностных водоемов, хозяйственно-бытовых и сточных вод, содержимого выгребных туалетов, ила, гидробионтов, мух, смывов с объектов окружающей среды, пищевых продуктов и другие и форма направления - в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.

2. Исследование проб воды из поверхностных водоемов

I этап исследования

Посевы проб воды из поверхностных водоемов с целью первичного накопления холерных вибрионов в зависимости от времени доставки (варианты).

1-й вариант - к пробе воды добавляют раствор основного пептона до 1%-й концентрации; определяют pH; подщелачивают 10%-м раствором едкого натра до pH 8,4 +/- 0,1 (1-я среда накопления). Время инкубации в 1-й среде накопления - 8-10 ч.

2-й вариант - в воду добавляют раствор основного пептона до 1%-й концентрации и теллурит калия из рабочего разведения 1:1000 до конечной концентрации 1:100000 или 1:200000 в соответствии с результатами его контроля; устанавливают pH 8,4 +/- 0,1 (1-я среда накопления). Время инкубации в 1-й среде накопления - 18-24 ч.

3-й вариант - производят фильтрование воды через мембранные фильтры N 2 или 3, смыв с фильтров сеют в 1-ю среду накопления (1%-я пептонная вода pH 8,4 +/- 0,1) и на щелочной агар.

II этап исследования

1-й вариант - через 8-10 ч от начала исследования:

- пересев с 1-й среды накопления во 2-ю (1%-ю пептонную воду с теллуритом калия и без него; при этом время инкубации в среде без теллурита калия - 6 ч, а с теллуритом калия - 18-20 ч) и на щелочной агар.

2-й вариант - через 18-24 ч от начала исследования:

- пересев с 1-й среды накопления во 2-ю (1%-ю пептонную воду без теллурита калия; при этом время инкубации в среде без теллурита калия - 6-8 ч) и на щелочной агар.

3-й вариант - через 12-18 ч от начала исследования:

- пересев с 1-й среды накопления во 2-ю среду накопления и на щелочной агар.

При интенсивном бактериальном загрязнении проб используют 3-ю среду накопления.

III этап исследования

Высев со 2-й среды накопления на щелочной агар.

IV этап исследования

Отбор колоний, подозрительных на колонии холерного вибриона, со щелочного агара в косо проходящем свете стереоскопического микроскопа.

Отсев колоний, подозрительных на колонии холерного вибриона, на одну из полиуглеводных сред и щелочной агар для накопления чистой культуры.

В случае проведения срочного анализа и при достаточном количестве подозрительных колоний:

- определение индофенолоксидазы;

- микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

- слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате - с Инаба, Огава), RO, O139 серогруппы;

- возможно использование методов МФА и РИВ.

В этом случае выдача устного предварительного положительного ответа по предусмотренной схеме об обнаружении в исследуемых пробах культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы, на основании результатов следующих тестов:

- характерные морфологические и культуральные признаки;

- положительный тест на индофенолоксидазу;

- положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками;

- положительные результаты ускоренной диагностики методами МФА и РИВ.

V этап исследования

Отбор культуры с характерным ростом на полиуглеводной среде и щелочном агаре.

Определение индофенолоксидазы.

Микроскопия мазка, окрашенного по Граму.

Слайд-агглютинация с сыворотками холерными O1 серогруппы (при положительном результате - с Инаба, Огава), RO, O139 серогруппы.

Возможно использование методов МФА и РИВ.

Выдача устного предварительного положительного ответа по предусмотренной схеме об обнаружении в исследуемых пробах культур, подозрительных на холерные вибрионы O1, RO или O139 серогруппы, на основании результатов следующих тестов:

- характерные морфологические и культуральные признаки;

- положительный тест на индофенолоксидазу;

- положительная реакция слайд-агглютинации с соответствующими холерными диагностическими сыворотками;

- положительные результаты ускоренной диагностики методами МФА и РИВ.

Подготовка выделенной культуры к транспортированию.

Срочная передача выделенной культуры для дальнейшей идентификации в установленном порядке.

Неагглютинирующиеся холерными сыворотками O1 серогруппы, RO и O139 серогруппы культуры идентифицируют на месте по биохимическим признакам с целью уточнения родовой и видовой принадлежности или по согласованию передают в лабораторию ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии".

3. Исследование хозяйственно-бытовых сточных вод

Подготовка проб сточной воды. Фильтрация сточной воды (1 л) через фильтр для освобождения от механических примесей (при необходимости).

При заборе сточных вод марлевыми тампонами их помещают в емкости с накопительной средой (1%-й раствор пептона); устанавливают pH 8,4 +/- 0,1 (1-я среда накопления). Время инкубации 1-й среды накопления - 8-10 ч, в случае добавления теллурита калия - 18-24 ч.

Далее этапы исследования хозяйственно-бытовых сточных вод осуществляются в соответствии с изложенными в п. 5.2.3.2 пп. 2 (Порядок исследования проб воды из поверхностных водоемов).

5.2.4. Оформление результатов исследования

Регистрация результатов анализа в лабораториях филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации производится по учетным формам в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.

5.2.5. Порядок взаимодействия филиалов ФБУЗ

"Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании

(городе, административном районе) в субъекте Российской

Федерации с учреждениями Роспотребнадзора

Информация о культуре холерного вибриона, выделенной в лаборатории филиала ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в субъекте Российской Федерации из объектов окружающей среды передается в соответствии со схемой выдачи результатов исследований на холеру (прилож. 10).

Культура холерного вибриона направляется в лабораторию ООИ ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации, а при ее отсутствии в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности или Центр индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней (региональное противочумное учреждение). Доставку осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

5.3. Порядок организации и проведения лабораторной

диагностики холеры для лабораторий ФБУЗ "Центр гигиены

и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации

5.3.1. Порядок организации и проведения лабораторной

диагностики холеры для лабораторий ФБУЗ "Центр гигиены

и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации,

в структуре которых отсутствуют отделы

и лаборатории особо опасных инфекций

Лаборатории ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъектах Российской Федерации, в структуре которых отсутствуют отделы и лаборатории особо опасных инфекций (имеющие санитарно-эпидемиологическое заключение на право работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности), при осуществлении эпидемиологического надзора за холерой проводят плановые профилактические исследования на холеру материала от лиц, подлежащих обследованию, и проб из объектов окружающей среды до этапа выделения культуры в следующем объеме:

1. Посев на среды накопления и элективную среду типа TCBS, выделение культуры, подозрительной на холерный вибрион;

2. Идентификация культуры, подозрительной на холерный вибрион, по следующим тестам:

- микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

- выявление индофенолоксидазы;

- слайд-агглютинация с холерными диагностическими сыворотками;

3. Экспресс- и ускоренная диагностика: методы МФА и РИВ.

Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъектах Российской Федерации, в структуре которых отсутствуют отделы или лаборатории особо опасных инфекций, соответствует порядку для лабораторий филиалов ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальных образованиях в субъектах Российской Федерации (раздел 5.2).

5.3.2. Порядок организации и проведения лабораторной

диагностики холеры для лабораторий особо опасных инфекций

ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте

Российской Федерации

5.3.2.1. Требования к лабораториям особо опасных инфекций

ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской

Федерации, осуществляющим бактериологические

исследования на холеру

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов

ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации, на базе которого функционируют лаборатории ООИ, должны иметь лицензию на осуществление деятельности, связанной с использованием возбудителей II-IV групп патогенности (опасности).

Лаборатории ООИ должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами II-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности).

Лаборатории ООИ ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации.

Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных культур холерных вибрионов должны осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру

Исследования на холеру могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы специализации по особо опасным инфекциям, имеющие допуск к работе с ПБА II-IV групп на основании приказа руководителя учреждения.

Требования к знаниям и умениям специалистов лаборатории ООИ ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии", выполняющих бактериологические исследования на холеру, приведены в прилож. 2.

Требования к обеспечению безопасности работы персонала

Каждая лаборатория должна иметь пакет документов, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Документы должны быть согласованы с комиссией по контролю требований биологической безопасности, специалистами по охране труда, противопожарным мероприятиям и утверждены руководителем учреждения. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале.

Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным и зараженным возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности (опасности), в соответствии с действующими нормативными документами.

Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований

Контроль качества диагностических исследований на холеру в лабораториях ООИ ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" включает:

- контроль качества питательных сред, диагностических препаратов и тест-систем, эталонных штаммов, дисков с антибактериальными препаратами, дистиллированной воды, дезинфицирующих средств, химических реактивов;

- контроль эффективности мембранных фильтров;

- своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования;

- контроль качества стерильности фильтровальных установок, лабораторной посуды;

- контроль качества стерилизации паровых и суховоздушных стерилизаторов;

- контроль работы бактерицидных ламп;

- контроль температурного режима работы холодильников и термостатов;

- проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности;

Результаты контроля фиксируют в специальных журналах.

Правила ведения документации

Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру

Для проведения диагностических исследований на холеру в лабораториях должны быть в наличии:

- питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 3, 8);

- диагностические препараты, тест-системы, антибактериальные препараты, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 4, 7, 8);

- химические реактивы (прилож. 5);

- приборы, оборудование, расходные материалы (прилож. 6).

5.3.2.2. Номенклатура и объем исследований

Лаборатории ООИ ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъектах Российской Федерации проводят:

- исследование материала от больных и умерших с подозрением на холеру;

- профилактические исследования материала от лиц, подлежащих обследованию на холеру в соответствии с требованиями эпиднадзора (по согласованию);

- исследования проб из объектов окружающей среды;

- идентификацию культур холерных вибрионов по полной схеме с определением эпидемической значимости в ПЦР по наличию генов ctxA и tcpA и антибиотикограммы диско-диффузионным методом;

- контроль качества питательных сред.

5.3.2.3. Порядок диагностических исследований на холеру

в лабораториях особо опасных инфекций ФБУЗ "Центр гигиены

и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации

Порядок исследования клинического материала осуществляется в соответствии с изложенным в п. 5.2.3.1.

Порядок бактериологического анализа на холеру проб из объектов окружающей среды соответствует п. 5.2.3.2.

В порядок бактериологического исследования на холеру (клинического материала и проб из объектов окружающей среды) дополнительно включены тесты идентификации культур холерных вибрионов, выделенных на различных этапах, а также культур, поступивших из ЛПУ и филиалов ФБУЗ:

- изучение культуральных, морфологических свойств и подвижности микробных клеток;

- определение типа расщепления глюкозы (тест Хью-Лейфсона);

- определение ферментации углеводов и многоатомных спиртов (сахарозы, маннозы, арабинозы и маннита);

- определение декарбоксилазной и дигидролазной активности по отношению к аминокислотам (аргинин, лизин, орнитин);

- постановка развернутой реакции агглютинации с холерными агглютинирующими сыворотками O1, Инаба, Огава, RO и реакции слайд-агглютинации с холерной сывороткой O139 серогруппы;

- оценка эпидемической значимости культуры комплексным методом - по

гемолитической активности в пробе Грейга, чувствительности к холерным

+ -

эльтор фагам ctx и ctx (кроме холерных вибрионов O139), в ПЦР на наличие

генов ctxA и tcpA, в реакции объемной агломерации с полимерным антилипазным

иммуноглобулиновым диагностикумом (PAO);

- определение принадлежности к биовару холерных вибрионов O1 серогруппы (определение чувствительности к диагностическим бактериофагам классическому и эльтор, постановка реакции гемагглютинации с куриными эритроцитами, определение чувствительности к 50 ед/мл полимиксина B, постановка реакции Фогес-Проскауэра);

- определение чувствительности к антибиотикам диско-диффузионным методом;

- ИХ-тест на определение O1 серогруппы (при положительном результате - ИХ-тест на определение серовара Инаба, Огава) или O139 серогруппы.

5.3.2.4. Оформление результатов исследования

Регистрация результатов анализа в лаборатории ООИ ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" производится по учетным формам в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.

5.3.2.5. Порядок взаимодействия

лабораторий особо опасных инфекций ФБУЗ "Центр гигиены

и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации

с учреждениями Роспотребнадзора

Информация о выделенных или идентифицированных культурах холерного вибриона передается в соответствии со схемой выдачи результатов исследований на холеру (прилож. 11) и направляется в Референс-центр по мониторингу за холерой.

Культуры холерного вибриона, выделенные от людей, из объектов окружающей среды и идентифицированные в лаборатории ООИ ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации, направляют в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности или Центр индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней (региональное противочумное учреждение). Срок доставки эпидемически значимых культур - не более 5 суток, остальные культуры доставляются не позднее одного месяца. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

6. Порядок организации и проведения лабораторной

диагностики холеры для лабораторий регионального уровня

6.1. Порядок организации и проведения лабораторной

диагностики холеры для лабораторий Региональных центров

по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных

болезней II-IV групп патогенности в федеральных округах

Лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности осуществляют:

- диагностические исследования материала от больных и умерших с подозрением на холеру;

- профилактические исследования материала от лиц, подлежащих обследованию на холеру в соответствии с требованиями эпидемиологического надзора (по согласованию);

- исследования проб из объектов окружающей среды в соответствии с требованиями эпидемиологического надзора;

- идентификацию культур холерных вибрионов по полной схеме;

- контроль качества питательных сред.

Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности в федеральных округах соответствует п. 5.3.2 "Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий особо опасных инфекций ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации".

Культуры холерных вибрионов O1 и O139 серогрупп, выделенные от людей, из объектов окружающей среды и идентифицированные в лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности, передают в Региональный центр по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности или Центр индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней (региональное противочумное учреждение). Срок доставки эпидемически значимых культур - не более 5 суток, остальные культуры доставляются не позднее одного месяца. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

6.2. Порядок организации и проведения лабораторной

диагностики холеры для лабораторий Региональных центров

по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней

I-II групп патогенности и Центров индикации

и диагностики возбудителей опасных

инфекционных болезней

6.2.1. Требования к лабораториям Региональных центров

по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней

I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики

возбудителей опасных инфекционных болезней

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов

Учреждения, на базе которых функционируют Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней I-II групп патогенности и Центры индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней, должны иметь лицензию на деятельность, связанную с использованием возбудителей I-II групп патогенности (опасности).

Лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней должны иметь санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности).

Лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации.

Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру

Исследования на холеру могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим образованием, окончившие курсы первичной специализации по ООИ по специальности "Бактериология", имеющие допуск к работе с ПБА I-II групп на основании приказа руководителя учреждения.

Инженерно-технический персонал и дезинфекторы проходят специальную подготовку по месту работы в соответствии с должностными обязанностями.

Специалисты, осуществляющие деятельность, связанную с использованием возбудителей инфекционных заболеваний, должны повышать квалификацию не реже одного раза в 5 лет и иметь сертификат специалиста.

Требования к обеспечению безопасности работы персонала

Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным или зараженным возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими нормативными документами.

Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований

Контроль качества диагностических исследований на холеру в лабораториях Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней включает:

- контроль эффективности мембранных фильтров;

- своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования;

- контроль качества стерильности фильтровальных установок, лабораторной посуды;

- контроль качества стерилизации паровых и суховоздушных стерилизаторов;

- контроль работы бактерицидных ламп;

- контроль температурного режима работы холодильников и термостатов;

- проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности;

- проверку санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроля смывов с поверхностей и оборудования.

Результаты контроля фиксируют в специальных журналах.

Правила ведения документации

Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру

Для проведения диагностических исследований на холеру в лабораториях должны быть в наличии:

- питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 3, 8);

- химические реактивы (прилож. 5);

- приборы, оборудование, расходные материалы (прилож. 6).

6.2.2. Номенклатура и объем исследований

- исследования материала от больных и умерших с подозрением на холеру;

- исследования проб из объектов окружающей среды;

- идентификацию культур холерных вибрионов, выделенных в прикрепленных субъектах, по полной схеме с определением эпидемиологической значимости;

- определение чувствительности холерных вибрионов к антибактериальным препаратам;

- серологическое обследование больных холерой, вибриононосителей и других контингентов населения - по эпидпоказаниям;

- проверку качества питательных сред и ингибиторов сопутствующей микрофлоры.

6.2.3. Порядок диагностических исследований

на холеру в лабораториях Региональных центров

по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I -

II групп патогенности и Центров индикации и диагностики

возбудителей опасных инфекционных болезней

Порядок исследования клинического материала и проб из объектов окружающей среды соответствует п. 5.2.3.

Идентификация культур холерных вибрионов осуществляется по полной схеме, изложенной в действующих методических указаниях по лабораторной диагностике холеры.

В порядок бактериологического исследования на холеру дополнительно включены исследования сывороток крови больных (переболевших) холерой, вибриононосителей, а также других контингентов населения (по эпидпоказаниям) на наличие агглютининов и вибриоцидных антител.

При определении агглютининов в сыворотке крови ставят:

- реакцию агглютинации с живыми культурами холерных вибрионов, выделенных от больных (вибриононосителей) в очаге в макро- или микрообъеме.

При определении вибриоцидных антител в сыворотке крови ставят:

- реакцию вибриоцидных антител (РВА) на основе чашечного метода (Finkelstein);

- РВА на основе ферментации углеводов.

6.2.4. Оформление результатов исследования

Регистрация результатов анализа в лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней производится по учетным формам в соответствии с действующими методическими указаниями по лабораторной диагностике холеры.

6.2.5. Порядок взаимодействия лабораторий Региональных

центров по мониторингу за возбудителями инфекционных

болезней I-II групп патогенности и Центров индикации

и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней

с учреждениями Роспотребнадзора

Информация о выделенных и/или идентифицированных культурах холерного вибриона передается в соответствии с действующей нормативной документацией и направляется в Референс-центр по мониторингу за холерой и в Национальный Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора, осуществляющий функцию Государственной коллекции возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I-II групп патогенности.

Штаммы холерных вибрионов, выделенные от людей, из объектов окружающей среды, идентифицированные в лабораториях Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и в Центрах индикации и диагностики опасных инфекционных болезней, направляют в Референс-центр по мониторингу за холерой.

Срок доставки эпидемически значимых культур - не более 5 суток, остальные культуры доставляются не позднее одного месяца. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

7. Порядок организации и проведения лабораторной

диагностики холеры для лабораторий федерального уровня

7.1. Порядок организации и проведения лабораторной

диагностики холеры для Референс-центра по мониторингу

за холерой

7.1.1. Требования к лабораториям Референс-центра

по мониторингу за холерой

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов

Учреждение, на базе которого функционирует Референс-центр по мониторингу за холерой, должно иметь лицензию на деятельность, связанную с использованием возбудителей I-II групп патогенности (опасности).

Лаборатории Референс-центра по мониторингу за холерой должны иметь санитарно-эпидемиологические заключения о возможности проведения работ с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности).

Лаборатории Референс-центра по мониторингу за холерой должны быть аккредитованы на техническую компетентность в установленном порядке в соответствии с действующей законодательной базой Российской Федерации.

Учет, хранение, передача и транспортирование выделенных подозрительных культур холерных вибрионов должны осуществляться в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

Требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру

Требования к обеспечению безопасности работы персонала

Порядок организации внутреннего контроля качества лабораторных исследований

Контроль качества диагностических исследований на холеру в лабораториях Референс-центра по мониторингу за холерой включает:

- контроль эффективности мембранных фильтров;

- своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования;

- контроль качества стерильности фильтровальных установок, лабораторной посуды;

- контроль качества стерилизации паровых и суховоздушных стерилизаторов;

- контроль температурного режима работы холодильников и термостатов;

- контроль работы бактерицидных ламп;

- проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности;

Результаты контроля фиксируют в специальных журналах.

Правила ведения документации

Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру

Для проведения диагностических исследований на холеру в лабораториях должны быть в наличии:

- питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке, и экспериментальные серии (прилож. 3, 8);

- диагностические препараты, тест-системы, антибактериальные препараты, зарегистрированные в установленном порядке, и экспериментальные серии (прилож. 4, 7, 8);

- химические реактивы (прилож. 5);

- приборы, оборудование, расходные материалы (прилож. 6).

7.1.2. Номенклатура и объем исследований

Лаборатории Референс-центра по мониторингу за холерой:

- проводят полную идентификацию и изучение биологических, молекулярно-биологических, биохимических свойств возбудителей холеры, в т.ч. культур с атипичными свойствами и вновь выявленных холерных вибрионов, явившихся причиной эпидемической вспышки;

- определяют чувствительность холерных вибрионов к антибактериальным препаратам, изучают механизмы резистентности;

- проводят серологическое обследование больных холерой, вибриононосителей и других контингентов населения - по эпидпоказаниям;

- проводят исследование клинического материала и проб окружающей среды - по эпидпоказаниям.

7.1.3. Организация и обеспечение диагностической

деятельности при мониторинге за холерой

Материалом для исследования служат культуры холерных вибрионов, в т.ч. культуры с атипичными свойствами, выделенные в лабораториях территориального и регионального уровней; вновь выявленные холерные вибрионы, явившиеся причиной вспышки; клинический материал, сыворотки крови больных холерой, вибриононосителей и других контингентов - по эпидпоказаниям.

При исследовании культур возбудителей холеры, в том числе культур с атипичными свойствами и вновь выявленных холерных вибрионов, явившихся причиной вспышки, используют биологические и современные высокотехнологичные методы бактериологического, иммуносерологического и молекулярно-генетического анализа, а также серологические методы при исследовании сывороток крови больных холерой, вибриононосителей и других контингентов населения, обследуемых по эпидемическим показаниям.

Порядок исследования клинического материала, проб из объектов окружающей среды на холеру соответствует п. 5.2.3.

Идентификация поступивших культур осуществляется по полной схеме:

- изучение морфологии микробных клеток;

- определение подвижности выделенной культуры в препарате висячей или раздавленной капли с последующим просмотром препаратов под микроскопом с фазово-контрастным устройством;

- определение наличия индофенолоксидазы;

- исследование методом флюоресцирующих антител;

- определение типа расщепления глюкозы в среде Хью-Лейфсона;

- определение способности ферментировать углеводы и многоатомные спирты;

- определение декарбоксилазной и дигидролазной активности по отношению к отдельным аминокислотам (лизин, аргинин, орнитин);

- определение биовара холерных вибрионов O1 серогруппы (определение чувствительности к диагностическим бактериофагам классическому и эльтор, постановка гемагглютинации с куриными эритроцитами, определение чувствительности к 50 ед./мл полимиксина B, постановка реакции Фогес-Проскауэра);

- определение эпидемической значимости культуры комплексным методом: по

гемолитической активности в пробе Грейга, чувствительности к холерным

+ -

эльтор ctx и ctx фагам ( кроме холерных вибрионов O139 серогруппы), в ПЦР

на наличие генов ctxA и tcpA, по определению холерогенности на модели

кроликов-сосунков, по результатам реакции объемной аггломерации с

использованием полимерного иммуноглобулинового антилипазного

диагностикума (РАО);

- определение чувствительности к антибиотикам (диско-диффузионным методом, методом серийных разведений в агаре и бульоне);

- постановка дополнительные тестов, определяющих принадлежность к роду Vibrio и виду Vibrio cholerae или другим видам патогенных вибрионов (определение протеолитических свойств; выявление диастатической активности; определение образования индола; определение образования сероводорода; выявление способности к биолюминесценции; определение галофильности вибрионов; определение способности вибрионов к росту при различных температурах; определение образования нитратредуктазы; определение образования бета-галактазидазы).

Расширенная характеристика культур с помощью молекулярно-биологических методов: по генам, ассоциированным с вирулентностью, проведение секвинирования, рестрикции, ген-амплификации, VNTR-типирование.

При идентификации культур холерных вибрионов с атипичными свойствами использование дополнительных серологических, иммунологических, биохимических и других методов для подтверждения принадлежности культур к роду Vibrio и виду Vibrio cholerae:

- ПЦР с использованием дополнительных специфических праймеров;

- реакции агглютинации с кроличьими холерными агглютинирующими сыворотками;

- реакции слайд-агглютинации с использованием моноклональных антител:

- реакции преципитации в геле;

- адсорбции агглютининов по Кастеллани;

- реакции агглютинации с убитыми кипячением культурами.

Применение серологических методов исследования в соответствии с действующими нормативными документами. В сыворотках больных холерой, вибриононосителей и других контингентов населения, обследуемых по эпидпоказаниям, выявляют агглютинины, вибриоцидные антитела.

При определении агглютининов в сыворотке крови ставят:

При определении вибриоцидных антител в сыворотке крови ставят:

- реакцию вибриоцидных антител (РВА) на основе чашечного метода (Finkelstein);

- РВА на основе ферментации углеводов.

Возможно применение препаратов, предназначенных для серологической диагностики.

7.1.4. Порядок взаимодействия лабораторий Референс-центра

по мониторингу за холерой с учреждениями Роспотребнадзора

Информация о выделенных и/или идентифицированных культурах холерного вибриона передается в соответствии с действующими нормативными документами и направляется в Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора, осуществляющий функцию Государственной коллекции возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I-II групп патогенности.

Культуры холерного вибриона, идентифицированные в лабораториях Референс-центра по мониторингу за холерой, передают в Национальный Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора, осуществляющий функцию Государственной коллекции возбудителей особо опасных бактериальных инфекций I-II групп патогенности.

Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности.

7.2. Порядок и организация

лабораторной диагностики холеры Национального Центра

верификации диагностической деятельности

7.2.1. Требования к лабораториям Национального Центра

верификации диагностической деятельности

Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов, требования к специалистам и персоналу, участвующим в выполнении исследований на холеру, требования к обеспечению безопасности работы персонала, порядок организации внутреннего контроля лабораторных исследований, правила ведения документации и требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения диагностических исследований на холеру, аналогичны п. 7.1.1.

7.2.2. Номенклатура и объем исследований

Лаборатории Национального Центра верификации диагностической деятельности проводят:

- верификацию результатов диагностики холеры и идентификации культур, полученных из Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности, Центров индикации и диагностики опасных инфекционных болезней Роспотребнадзора, Референс-центра по мониторингу за холерой;

- выполняют диагностические исследования материала от больных холерой и умерших от этого заболевания - по эпидпоказаниям;

- осуществляют хранение коллекционных штаммов, охраноспособное и авторское депонирование.

7.2.3. Организация и обеспечение

диагностической деятельности

Идентификацию культур осуществляют по полной схеме, дополнительно проводят:

- секвенирование фрагментов генов 16S-23S рДНК и других видоспецифичных локусов;

- определение генотипов штаммов холерных вибрионов.

На основании результатов расширенной характеристики штаммов холерных вибрионов составляют паспорта на штаммы, хранящиеся в Национальном Центре верификации диагностической деятельности, осуществляющем функции Государственной коллекции.

7.2.4. Порядок взаимодействия лабораторий

Национального Центра верификации диагностической

деятельности с учреждениями Роспотребнадзора

Национальный Центр верификации диагностической деятельности Роспотребнадзора направляет результаты проведенных исследований в Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности, Центры индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней, Референс-центр по мониторингу за холерой.

Приложение 3

ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ,

ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

N п/п	Питательные среды	Территориальный уровень				Региональный уровень			Федеральный уровень
N п/п	Питательные среды	ЛПУ	филиалы ФБУЗ ЦГиЭ	ФБУЗ ЦГиЭ (без лабора- торий ООИ)	ФБУЗ ЦГиЭ (с лабора- ториями ООИ)	региональ- ные центры по монито- рингу за возбудите- лями II- IV групп патогенно- сти	региональ- ные центры по монито- рингу за возбудите- лями I- II групп патогенно- сти	центры индика- ции и диагно- стики	рефе- ренс- центр по мо- нито- рингу за хо- лерой	нацио- нальный центр верифи- кации
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
1	Основной раствор пептона	-	+	+	+	+	+	+	+	+
2	1%-я пептонная вода	+	+	+	+	+	+	+	+	+
3	Щелочной агар	+	+	+	+	+	+	+	+	+
4	TCBS	+	+	+	+	+	+	+	+	+
5	СЭДХ	+	+	+	+	+	+	+	+	+
6	Полиуглеводные среды	+	+	+	+	+	+	+	+	+
7	Среда Хью- Лейфсона	-	+	+	+	+	+	+	+	+
8	Среда Гисса с сахарозой	-	+	+	+	+	+	+	+	+
9	Среда Гисса с маннозой	-	+	+	+	+	+	+	+	+
10	Среда Гисса с арабинозой	-	+	+	+	+	+	+	+	+
11	Среда Гисса с лактозой	-	+	+	+	+	+	+	+	+
12	Среда Гисса с глюкозой	-	+	+	+	+	+	+	+	+
13	Среда Гисса с инозитом	-	+	+	+	+	+	+	+	+
14	Среда Гисса с маннитом	-	+	+	+	+	+	+	+	+
15	Среда Гисса с крахмалом	-	-	-	+	+	+	+	+	+
16	Бульон Мартена pH 7,6	-	-	-	+	+	+	+	+	+
17	Среда для определения декарбоксилазы лизина	-	+	+	+	+	+	+	+	+
18	Среда для определения декарбоксилазы орнитина	-	+	+	+	+	+	+	+	+
19	Среда для определения дигидролазы аргинина	-	+	+	+	+	+	+	+	+
20	Бульон Кларка	-	-	-	+	+	+	+	+	+
21	Среда с желатиной	-	-	-	+	+	+	+	+	+
22	Питательный агар pH 7,2	-	-	-	+	+	+	+	+	+
23	Бульон Хоттингера pH 7,2	-	-	-	+	+	+	+	+	+
24	Бульон Хоттингера с 0,1% азотнокислого калия (KNO3) pH 7,2	-	-	-	+	+	+	+	+	+
25	Питательный агар с 10% лактозы	-	-	-	+	+	+	+	+	+
26	Агар Мартена 0,3 - 0,5 - 0,7% pH 7,6	-	-	-	+	+	+	+	+	+
27	Питательная среда для определения чувствительно- сти к антибактериаль- ным препаратам	-	-	-	+	+	+	+	+	+

Приложение 4

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ, ТЕСТ-СИСТЕМЫ,

ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

N п/п	Диагностические препараты, тест-системы, биологические препараты	Территориальный уровень				Региональный уровень			Федеральный уровень
N п/п		ЛПУ	фи- лиалы ФБУЗ ЦГиЭ	ФБУЗ ЦГиЭ (без лабо- рато- рий ООИ)	ФБУЗ ЦГиЭ (с лабо- рато- риями ООИ)	региональ- ные центры по монито- рингу за возбудите- лями II-IV групп патогенно- сти	региональ- ные центры по монито- рингу за возбудите- лями I- II групп патогенно- сти	центры инди- кации и ди- агно- стики	рефе- ренс- центр по монито- рингу за холерой	нацио- нальный центр верифи- кации
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
1	Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие холерные адсорбированные, лошадиные	+ <*>	+ <*>	+ <*>	+	+	+	+	+	+
2	Сыворотка диагностическая холерная O1 адсорбированная сухая для РА	+	+	+	+	+	+	+	+	+
3	Сыворотка диагностическая холерная Огава адсорбированная сухая для РА	+	+	+	+	+	+	+	+	+
4	Сыворотка диагностическая холерная Инаба адсорбированная сухая для РА	+	+	+	+	+	+	+	+	+
5	Сыворотка диагностическая холерная RO адсорбированная сухая для РА	+	+	+	+	+	+	+	+	+
6	Сыворотка диагностическая холерная O139 адсорбированная сухая для РА на стекле	+	+	+	+	+	+	+	+	+
7	Бактериофаги диагностические холерные классический и эльтор	-	-	-	+	+	+	+	+	+
8	Бактериофаги диагностические холерные ctx+ и ctx-	-	-	-	+	+	+	+	+	+
9	Микротест-система для ускоренного определения групп вибрионов по Хейбергу (МТС-Х)	-	+	+	+	+	+	+	+	+
10	Микрообъемная тест-система для биохимической идентификации вибрионов	-	+	+	+	+	+	+	+	+
11	Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов: Система 1 - для идентификации вибрионов	-	+	+	+	+	+	+	+	+
12	Комплемент сухой	-	-	-	+	+	+	+	+	+
13	Эритроциты барана (свежие или консервированные)	-	-	-	+	+	+	+	+	+
14	Эритроциты куриные или морской свинки (свежие или кон- сервированные)	-	-	-	+	+	+	+	+	+
15	Тест-система для выявления ДНК V. cholerae + + (ctx A и tcp A )	-	-	-	+	+	+	+	+	+
16	Набор реактивов для проведения электрофореза продуктов ПЦР	-	-	-	+	+	+	+	+	+
17	Набор для выделения ДНК на основе метода нуклеосорбции	-	-	-	+	+	+	+	+	+
18	Универсальный набор для амплификации ДНК	-	-	-	+	+	+	+	+	+
19	Тест-система ОКСИ-тест	+	+	+	+	+	+	+	+	+
20	Диагностикум антилипазный иммуноглобулиновый полимерный сухой для выявления гемолитических штаммов холерных вибрионов	-	-	-	+	+	+	+	+	+
21	ИХА-тест на O1	-	-	-	+	+	+	+	+	+
22	ИХА-тест на O139	-	-	-	+	+	+	+	+	+
<*> При наличии люминесцентного микроскопа

Приложение 5

ХИМИЧЕСКИЕ РЕАКТИВЫ,

ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

N п/п	Реактивы и краски	Территориальный уровень				Региональный уровень			Федеральный уровень
N п/п	Реактивы и краски	ЛПУ	фи- лиалы ФБУЗ ЦГиЭ	ФБУЗ ЦГиЭ (без лабо- рато- рий ООИ)	ФБУЗ ЦГиЭ (с ла- бора- тория- ми ООИ)	региональ- ные центры по монито- рингу за возбудите- лями II- IV групп патогенно- сти	региональ- ные центры по монито- рингу за возбудите- лями I- II групп патогенно- сти	центры инди- кации и диа- гнос- тики	рефе- ренс- центр по монито- рингу за холерой	нацио- нальный центр верифи- кации
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
Краски
1	Бромтимоловый синий	-	-	-	+	+	+	+	+	+
2	Генцианвиолет	+	+	+	+	+	+	+	+	+
3	Феноловый красный	+	+	+	+	+	+	+	+	+
4	Фуксин основной	+	+	+	+	+	+	+	+	+
Сахара и многоатомные спирты
5	Арабиноза	-	+	+	+	+	+	+	+	+
6	Инозит	-	+	+	+	+	+	+	+	+
7	Глюкоза	+	+	+	+	+	+	+	+	+
8	Маннит	-	+	+	+	+	+	+	+	+
9	Манноза	-	+	+	+	+	+	+	+	+
10	Лактоза	+	+	+	+	+	+	+	+	+
11	Сахароза	+	+	+	+	+	+	+	+	+
Аминокислоты
12	Лизин	-	+	+	+	+	+	+	+	+
13	Орнитин	-	+	+	+	+	+	+	+	+
14	Аргинин	-	+	+	+	+	+	+	+	+
Реактивы
15	альфа-нафтиламин	-	-	-	+	+	+	+	+	+
16	альфа-нафтол	+	+	+	+	+	+	+	+	+
17	Диметил- парафенилендиамин дигидрохлорид (или тетраметил- парафенилендиамин, или аминодиметил- анилин гидрохлорид (оксалат)	+	+	+	+	+	+	+	+	+
18	Железо серно-кислое закисное	+	+	+	+	+	+	+	+	+
19	Йод кристаллический	+	+	+	+	+	+	+	+	+
20	Калий азотно-кислый	-	-	-	+	+	+	+	+	+
21	Калий едкий	-	-	-	+	+	+	+	+	+
22	Калий йодистый	+	+	+	+	+	+	+	+	+
23	Калий фосфорно-кислый двузамещенный (K2HPO4)	-	-	-	+	+	+	+	+	+
24	Калий фосфорно-кислый однозамещенный (KH2PO4)	+	+	+	+	+	+	+	+	+
25	Калия нитрат	+	+	+	+	+	+	+	+	+
26	Калия теллурит	+	+	+	+	+	+	+	+	+
27	Кислота борная	-	-	-	+	+	+	+	+	+
28	Кислота карболовая	+	+	+	+	+	+	+	+	+
29	Кислота лимонная	-	-	-	+	+	+	+	+	+
30	Кислота уксусная	-	-	-	+	+	+	+	+	+
31	Кислота соляная	-	-	-	+	+	+	+	+	+
32	Кислота сульфаниловая	-	-	-	+	+	+	+	+	+
33	Кислота щавелевая	-	-	-	+	+	+	+	+	+
34	Натрий двууглекислый	-	-	-	+	+	+	+	+	+
35	Натрий едкий	+	+	+	+	+	+	+	+	+
36	Натрий лимонно-кислый (цитрат)	-	-	-	+	+	+	+	+	+
37	Натрий углекислый (карбонат)	+	+	+	+	+	+	+	+	+
38	Натрий фосфатно-кислый	-	-	-	+	+	+	+	+	+
39	Натрий хлористый	+	+	+	+	+	+	+	+	+
40	Натрия сульфат	+	+	+	+	+	+	+	+	+
41	Натрия сульфит	+	+	+	+	+	+	+	+	+
42	Натрия тиосульфат	+	+	+	+	+	+	+	+	+
43	Свинец уксусно-кислый	-	-	-	+	+	+	+	+	+
44	O-нитрофенил-бета- Д-галактопиранозид (ONPG)	-	-	-	+	+	+	+	+	+
45	Парадиметиламино- бензальдегид	-	-	-	+	+	+	+	+	+
46	Риванол	-	-	-	+	+	+	+	+	+
Прочие
47	Вода дистиллированная	+	+	+	+	+	+	+	+	+
48	Глицерин	+	+	+	+	+	+	+	+	+
49	Желатина	-	-	-	+	+	+	+	+	+
50	Крахмал растворимый	-	-	-	+	+	+	+	+	+
51	Масло вазелиновое	-	-	-	+	+	+	+	+	+
52	Масло иммерсионное	+	+	+	+	+	+	+	+	+
53	Масло иммерсионное нефлуоресцирующее	+	+	+	+	+	+	+	+	+
54	Песок кварцевый	-	+	+	+	+	+	+	+	+
Прочие медикаменты и дезсредства
55	Спирт этиловый	+	+	+	+	+	+	+	+	+
56	Хлороформ	-	-	-	-	-	-	-	+	+
57	Хлорамин или другие регламентированные дезинфектанты	+	+	+	+	+	+	+	+	+

Приложение 6

ПРИБОРЫ, ОБОРУДОВАНИЕ, РАСХОДНЫЕ МАТЕРИАЛЫ,

ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

N п/п	Приборы и оборудование	Территориальный уровень				Региональный уровень			Федеральный уровень
N п/п	Приборы и оборудование	ЛПУ	фи- лиалы ФБУЗ ЦГиЭ	ФБУЗ ЦГиЭ (без лабо- рато- рий ООИ)	ФБУЗ ЦГиЭ (с лабора- ториями ООИ)	регио- нальные центры по монито- рингу за возбуди- телями II-IV групп па- тогенно- сти	регио- нальные центры по монито- рингу за возбуди- телями I-II групп па- тогенно- сти	центры инди- кации и ди- агно- стики	рефе- ренс- центр по мо- нито- рингу за хо- лерой	нацио- нальный центр верифи- кации
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
1	Автоклав	+	+	+	+	+	+	+	+	+
2	Аппарат для инактивирования сывороток	-	-	-	+	+	+	+	+	+
3	Боксы биологической безопасности II класса	+	+	+	+	+	+	+	+	+
4	Весы	+	+	+	+	+	+	+	+	+
5	Гидропульт	+	+	+	+	+	+	+	+	+
6	Дистиллятор электрический	+	+	+	+	+	+	+	+	+
7	Лабораторный pH-метр	+	+	+	+	+	+	+	+	+
8	Лупа ручная 1 x 10, 1 x 2,5	+	+	+	+	+	+	+	+	+
9	Микроскоп бинокулярный	+	+	+	+	+	+	+	+	+
10	Микроскоп люминесцентный	+	+	+	+	+	+	+	+	+
11	Микроскоп с устройством косого освещения	+	+	+	+	+	+	+	+	+
12	Облучатель бактерицидный	-	+	+	+	+	+	+	+	+
13	Осветители к микроскопам	+	+	+	+	+	+	+	+	+
14	Пипетки автоматические	+	+	+	+	+	+	+	+	+
15	Стерилизаторы электрические разных размеров	+	+	+	+	+	+	+	+	+
16	Сухожаровой шкаф стерилизационный	+	+	+	+	+	+	+	+	+
17	Термостат	+	+	+	+	+	+	+	+	+
18	Устройство фазово- контрастное	+	+	+	+	+	+	+	+	+
19	Холодильник бытовой	+	+	+	+	+	+	+	+	+
20	Центрифуга лабораторная	+	+	+	+	+	+	+	+	+
21	Бикс металлический	+	+	+	+	+	+	+	+	+
22	Ножницы	+	+	+	+	+	+	+	+	+
23	Скальпель	+	+	+	+	+	+	+	+	+
24	Пинцет анатомический	+	+	+	+	+	+	+	+	+
25	Петледержатели	+	+	+	+	+	+	+	+	+
26	Петли бактерио- логические	+	+	+	+	+	+	+	+	+
27	Петли ректальные для забора материала	+	+	+	+	+	+	+	+	+
28	Пробки целлюлозные разного размера	+	+	+	+	+	+	+	+	+
29	Пробки резиновые разного размера	+	+	+	+	+	+	+	+	+
30	Стандарт мутности для приготовления микробной взвеси N 5 и N 10	-	-	-	+	+	+	+	+	+
31	Фильтры мембранные N 2 и N 3	-	+	+	+	+	+	+	+	+
32	Фильтры Зейтца 30 мм с устройством для фильтрации	-	+	+	+	+	+	+	+	+
33	Часы песочные	+	+	+	+	+	+	+	+	+
34	Чашки Петри одноразовые	+	+	+	+	+	+	+	+	+
35	Штативы на 40 и 20 гнезд	+	+	+	+	+	+	+	+	+
Оборудование для ПЦР диагностики и генетических исследований
1	Автоматический флюориметр типа "Джин"	-	-	-	+	+	+	+	+	+
2	Видеосистема результатов электрофореза	-	-	-	+	+	+	+	+	+
3	Источник постоянного тока	-	-	-	+	+	+	+	+	+
4	Компьютер	-	-	-	+	+	+	+	+	+
5	Комплект для проведения электрофореза	-	-	-	+	+	+	+	+	+
6	Программируемый термоциклер (амплификатор)	-	-	-	+	+	+	+	+	+
7	Пробирки пропиленовые разного объема	-	-	-	+	+	+	+	+	+
8	Твердотельный термостат	-	-	-	+	+	+	+	+	+
9	Ультрафиолетовый трансиллюминатор 310 - 320 нм фильтр 20 x 20 см	-	-	-	+	+	+	+	+	+
10	Фотоаппарат цифровой с комплектом светофильтров	-	-	-	+	+	+	+	+	+
11	Центрифуга лабораторная настольная	-	-	-	+	+	+	+	+	+
12	Микроцентрифуга лабораторная настольная 1200 g	-	-	-	+	+	+	+	+	+
13	Амплификатор для проведения амплификации в режиме реального времени	-	-	-	+	+	+	+	+	+
14	ПЦР-бокс	-	-	-	+	+	+	+	+	+
15	Комплект автоматических пипеток	-	-	-	+	+	+	+	+	+
16	Секвенатор	-	-	-	-	-	-	-	-	+
Оборудование для отбора проб
1	Комплект медицинский (укладка универсальная для забора мате- риала от людей и из объектов окружающей среды для исследования на особо опасные инфекционные болезни)	+	+	+	+	+	+	+	+	+
Стекло лабораторное
1	Банки стеклянные с притертой пробкой разного размера	+	+	+	+	+	+	+	+	+
2	Бутыли емкостью 1 л	-	+	+	+	+	+	+	+	+
3	Пипетки градуи- рованные на 1, 2, 5, 10 мл	+	+	+	+	+	+	+	+	+
4	Пипетки пастеровские	+	+	+	+	+	+	+	+	+
5	Пробирки агглютинационные	-	-	-	+	+	+	+	+	+
6	Пробирки бакте- риологические	+	+	+	+	+	+	+	+	+
7	Пробирки центрифужные	-	-	-	+	+	+	+	+	+
8	Поплавки	-	-	-	+	+	+	+	+	+
9	Стаканы фарфоровые или граненые	+	+	+	+	+	+	+	+	+
10	Стекло предметное	+	+	+	+	+	+	+	+	+
11	Стекло с лункой	+	+	+	+	+	+	+	+	+
12	Стекло покровное	+	+	+	+	+	+	+	+	+
13	Ступки фарфоровые	+	+	+	+	+	+	+	+	+
14	Спиртовки	+	+	+	+	+	+	+	+	+
15	Флаконы разного объема	+	+	+	+	+	+	+	+	+
16	Цилиндры мерные	+	+	+	+	+	+	+	+	+
17	Шпатели	-	-	-	+	+	+	+	+	+

Приложение 7

АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ,

ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ

N п/п	Антибактериальные препараты и растворители для них	Территориальный уровень				Региональный уровень			Федеральный уровень
N п/п	Антибактериальные препараты и растворители для них	ЛПУ	фи- лиалы ФБУЗ ЦГиЭ	ФБУЗ ЦГиЭ (без лабо- рато- рий ООИ)	ФБУЗ ЦГиЭ (с ла- бора- тория- ми ООИ)	региональ- ные центры по монито- рингу за возбуди- телями II-IV групп па- тогенно- сти	региональ- ные центры по монито- рингу за возбудите- лями I-II групп па- тогенно- сти	центры инди- кации и ди- агно- стики	рефе- ренс- центр по мо- нито- рингу за хо- лерой	нацио- наль- ный центр вери- фика- ции
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
1	Диметилсульфоксид (растворитель для АБП)	-	-	-	-	-	-	-	+	+
2	Доксициклин	-	-	-	-	-	-	-	+	+
3	Тетрациклин	-	-	-	-	-	-	-	+	+
4	Левомицетин	-	-	-	-	-	-	-	+	+
5	Налидиксовая кислота	-	-	-	-	-	-	-	+	+
6	Ципрофлоксацин	-	-	-	-	-	-	-	+	+
7	Фуразолидон	-	-	-	-	-	-	-	+	+
8	Ампициллин	-	-	-	-	-	-	-	+	+
9	Цефотаксим	-	-	-	-	-	-	-	+	+
10	Рифампицин	-	-	-	-	-	-	-	+	+
11	Стрептомицин	-	-	-	-	-	-	-	+	+
12	Гентамицин	-	-	-	-	-	-	-	+	+
13	Канамицин	-	-	-	-	-	-	-	+	+
14	Сульфаметоксазол/ триметоприм или сульфамонометак- син/триметоприм	-	-	-	-	-	-	-	+	+
15	Полимиксин "M" или "B"	-	-	-	+	+	+	+	+	+
16	Диски с антибак- териальными препаратами: доксициклин тетрациклин левомицетин налидиксовая кислота ципрофлоксацин фуразолидон ампициллин цефотаксим рифампицин стрептомицин гентамицин канамицин сульфаметоксазол/ триметоприм или сульфамонометак- син/триметоприм	-	-	-	+	+	+	+	+	+

Приложение 8

ПЕРЕЧЕНЬ

ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ, ТЕСТ-СИСТЕМ И ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД

ДЛЯ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРЫ <*>

--------------------------------

<*> Из практического руководства "Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней". М., 2009. - дополненное.

┌─────┬───────────────────────┬────────────────┬────────────────────────────┬──────────────────────────┐

│ N │Наименование препарата │Регистрационный │ Номер удостоверения │ Разработчик │

│ п/п │ │ номер │ нормативной документации │ │

│ │ │ удостоверения │ │ │

├─────┼───────────────────────┼────────────────┼────────────────────────────┼──────────────────────────┤

│ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │

├─────┴───────────────────────┴────────────────┴────────────────────────────┴──────────────────────────┤

│ Зарегистрированные препараты, тест-системы и питательные среды │

├─────┬───────────────────────┬────────────────┬────────────────────────────┬──────────────────────────┤

│ 1 │Иммуноглобулины │ФСР 2007/00 877 │ТУ 8961-015-01 898 109-2007 │ФГУЗ РосНИПЧИ "Микроб" │

│ │диагностические │ │ │410005, г. Саратов, ул. │

│ │флуоресцирующие │ │ │Университетская, д. 46 │

│ │холерные │ │ │Тел.: (8452) 26-21-31 │

│ │адсорбированные │ │ │Факс: (8452) 51-52-12 │

│ │лошадиные, лиофилизат │ │ │E-mail: microbe@san.ru │

│ │для диагностических │ │ │Веб-сайт: www.microbe.ru │

│ │целей │ │ │ │

│ 2 │Сыворотки │ФСР 2007/00 467 │ТУ 8938-010-01 898 109-2007 │ -"- │

│ │диагностические │ │ │ │

│ │холерные Огава и Инаба │ │ │ │

│ │адсорбированные сухие │ │ │ │

│ │для реакции │ │ │ │

│ │агглютинации (РА) │ │ │ │

│ 3 │Сыворотка │ФСР 2007/00 468 │ТУ 8938-009-01 898 109-2007 │ -"- │

│ │диагностическая │ │ │ │

│ │холерная O1 │ │ │ │

│ │адсорбированная сухая │ │ │ │

│ │для реакции │ │ │ │

│ │агглютинации (РА) │ │ │ │

│ 4 │Сыворотка │ФСР 2007/00 469 │ТУ 8938-011-01 898 109-2007 │ -"- │

│ │диагностическая │ │ │ │

│ │холерная RO │ │ │ │

│ │адсорбированная сухая │ │ │ │

│ │для реакции │ │ │ │

│ │агглютинации (РА) │ │ │ │

│ 5 │Тест-система для │ФСР 2007/00 100 │ТУ 8895-006-01 898 109-2007 │ -"- │

│ │выявления ДНК Vibrio │ │ │ │

│ │ + │ │ │ │

│ │cholerae (ctx A ) │ │ │ │

│ │методом полимеразной │ │ │ │

│ │цепной реакции (ГенХол)│ │ │ │

│ 6 │Бактериофаги │2007/01 532 │ТУ 8637-014-01 898 109-2007 │ -"- │

│ │диагностические │ │ │ │

│ │холерные классический и│ │ │ │

│ │эльтор, лиофилизат для │ │ │ │

│ │диагностических целей │ │ │ │

│ 7 │Фаг дифференциально- │2007/00 466 │ТУ 8937-013-01 898 109-2007 │ -"- │

│ │диагностический (ДДФ) │ │ │ │

│ │вида V. cholerae, │ │ │ │

│ │лиофилизат для │ │ │ │

│ │диагностических целей │ │ │ │

│ 8 │Бактериофаги │ФСР 2007/00 880 │ТУ 8937-002-01 898 109-2007 │ -"- │

│ │диагностические │ │ │ │

│ │ + │ │ │ │

│ │холерные эльтор CTX и │ │ │ │

│ │ - │ │ │ │

│ │CTX , раствор для │ │ │ │

│ │диагностических целей │ │ │ │

│ │ + - │ │ │ │

│ │(фаги ctx и ctx ) │ │ │ │

│ 9 │Микротест-система для │99/86/3 │ФСП 42-0504-7632-06 │Филиал ФГУП "Микроген" в │

│ │ускоренного определения│ │ │г. Махачкала НПО │

│ │групп вибрионов по │ │ │"Питательные среды" │

│ │Хейбергу (МТС-X) │ │ │ │

│ 10 │Микротест-система для │99/86/2 │ФСП 42-0504-7631-06 │ -"- │

│ │биохимической │ │ │ │

│ │идентификации вибрионов│ │ │ │

│ │(МТС-V) │ │ │ │

│ 11 │Системы индикаторные │ЛС-000 308 │ФСП 42-0504 382-704 │Филиал ФГУП НПО │

│ │бумажные для │ │ │"Микроген" в г. Нижний │

│ │идентификации │ │ │Новгород Нижегородское │

│ │микроорганизмов (СИБ). │ │ │предприятие по │

│ │Набор диагностический N│ │ │производству бактерийных │

│ │1 для идентификации │ │ │препаратов "Имбио" │

│ │вибрионов │ │ │ │

│ 12 │Пептон основной сухой │ЛС-001 072 │ФСП 42-05 042 128-04 │Филиал ФГУП "Микроген" в │

│ │ │ │ │г. Махачкала НПО │

│ │ │ │ │"Питательные среды" │

│ 13 │Пептон основной сухой │0014/01-2002 г. │ФСП 42-0010-2040-01 │ОАО "Биомед" им. │

│ │ │ │ │И.И. Мечникова │

│ │ │ │ │Московская обл., │

│ │ │ │ │п. Петрово-Дальнее │

│ 14 │Питательная среда для │ФСР 2009/05472 │ТУ 9385-038-78095326-2008 │ФГУН ГНЦ ПМБ │

│ │накопления холерного │ │ │142279, Московская │

│ │вибриона сухая "Пептон │ │ │область, │

│ │основной сухой" │ │ │Серпуховский район, п. │

│ │ │ │ │Оболенск │

│ │ │ │ │Тел.: (4967) 36-00-09 │

│ │ │ │ │Тел./факс: (4967) 36-00-20│

│ │ │ │ │E-mail: info@obolensk.org │

│ │ │ │ │Веб-сайт: │

│ │ │ │ │www.obolensk.org │

│ 15 │Питательная среда для │ЛС-001 094 │ФСП 42-0504-2132-04 │Филиал ФГУП "Микроген" в │

│ │выделения и │ │ │г. Махачкала НПО │

│ │культивирования │ │ │"Питательные среды" │

│ │холерного вибриона │ │ │ │

│ │(щелочной агар) сухая │ │ │ │

│ 16 │Питательная среда для │002 122/01-2003 │ФСП 42-0010-2989-02 │ОАО "Биомед" им. И.И. │

│ │выделения и │г. │ │Мечникова │

│ │культивирования │ │ │Московская обл., │

│ │холерного вибриона │ │ │п. Петрово-Дальнее │

│ │сухая (щелочной агар) │ │ │ │

│ 17 │Питательная среда для │ФСР 2009/05473 │ТУ 9385-039-78095326-2008 │ФГУН ГНЦ ПМБ │

│ │выделения и │ │ │142279, Московская │

│ │культивирования │ │ │область, │

│ │холерного вибриона │ │ │Серпуховский район, п. │

│ │сухая "Щелочной агар" │ │ │Оболенск │

│ │ │ │ │Тел.: (4967) 36-00-09 │

│ │ │ │ │Тел./факс: (4967) 36-00-20│

│ │ │ │ │E-mail: info@obolensk.org │

│ │ │ │ │Веб-сайт: www.obolensk.org│

│ 18 │Набор реагентов для │ФСР 2011/10006 │ТУ 9398-111-78095326-201 │ -"- │

│ │бактериологических │ │ │ │

│ │исследований │ │ │ │

│ │"Питательная среда для │ │ │ │

│ │первичной идентификации│ │ │ │

│ │энтеробактерий сухая" │ │ │ │

│ │(Железо-глюкозо- │ │ │ │

│ │лактозный агар с │ │ │ │

│ │мочевиной) │ │ │ │

│ 19 │Питательная среда для │ФСР 2008/03494 │ТУ 9398-049-78095326-2008 │ -"- │

│ │идентификации │ │ │ │

│ │энтеробактерий сухая │ │ │ │

│ │(Среда Гисса-ГРМ с │ │ │ │

│ │лактозой) │ │ │ │

│ 20 │Питательная среда для │ФСР 2008/03494 │ТУ 9398-049-78095326-2008 │ -"- │

│ │идентификации │ │ │ │

│ │энтеробактерий сухая │ │ │ │

│ │(Среда Гисса-ГРМ с │ │ │ │

│ │сахарозой) │ │ │ │

│ 21 │Питательная среда для │ФСР 2008/03494 │ТУ 9398-049-78095326-2008 │ -"- │

│ │идентификации │ │ │ │

│ │энтеробактерий сухая │ │ │ │

│ │(Среда Гисса-ГРМ с │ │ │ │

│ │глюкозой) │ │ │ │

│ 22 │Питательная среда для │ФСР 2008/03494 │ТУ 9398-049-78095326-2008 │ -"- │

│ │идентификации │ │ │ │

│ │энтеробактерий сухая │ │ │ │

│ │(Среда Гисса-ГРМ с │ │ │ │

│ │мальтозой) │ │ │ │

│ 23 │Питательная среда для │ФСР 2008/03494 │ТУ 9398-049-78095326-2008 │ -"- │

│ │идентификации │ │ │ │

│ │энтеробактерий сухая │ │ │ │

│ │(Среда Гисса-ГРМ с │ │ │ │

│ │маннитом) │ │ │ │

│ 24 │Набор реагентов для │ФС 01012006/ │ТУ 9398-013-78095326-2006 │ -"- │

│ │контроля микробной │4122-06 │ │ │

│ │загрязненности │ │ │ │

│ │(трехсахарный агар с │ │ │ │

│ │солями железа - для │ │ │ │

│ │выявления сероводорода │ │ │ │

│ │и определения │ │ │ │

│ │ферментации лактозы, │ │ │ │

│ │глюкозы, сахарозы) │ │ │ │

│ │"Питательная среда N 13│ │ │ │

│ │ГРМ" │ │ │ │

│ 25 │Питательная среда для │ФСР 2008/02818 │ТУ 9398-048-78095326-2007 │ -"- │

│ │первичной идентификации│ │ │ │

│ │энтеробактерий сухая │ │ │ │

│ │(среда Ресселя-ГРМ) │ │ │ │

│ 26 │Бактериофаги │ФСР 2008/03009 │ТУ 8637-019-01 898 109-2007 │ФГУЗ РосНИПЧИ "Микроб" │

│ │диагностические │ │ │410005, г. Саратов, ул. │

│ │холерные ТЭПВ-1, │ │ │Университетская, д. 46 │

│ │ТЭПВ-2, ТЭПВ-3, │ │ │Тел.: (8452) 26-21-31 │

│ │ТЭПВ-4, ТЭПВ-5, ТЭПВ-6,│ │ │Факс: (8452) 51-52-12 │

│ │ТЭПВ-7, раствор для │ │ │E-mail: microbe@san.ru │

│ │диагностических целей │ │ │Веб-сайт: www.microbe.ru │

│ 27 │Сыворотка │ФСР 2008/03209 │ТУ 9389-018-01 898 109-2008 │ -"- │

│ │диагностическая │ │ │ │

│ │холерная не O1 группы │ │ │ │

│ │O139 адсорбированная │ │ │ │

│ │кроличья для реакции │ │ │ │

│ │агглютинации (РА) на │ │ │ │

│ │стекле, лиофилизат для │ │ │ │

│ │диагностических целей │ │ │ │

│ Незарегистрированные и разрабатываемые препараты и тест-системы (используются лабораториями │

│ территориального и регионального уровней только после регистрации) │

│ 28 │Питательная среда для │ │ТУ 9398-062-78 095 326-2007 │ФГУН ГНЦ ПМБ │

│ │выделения возбудителя │ │ │142279, Московская │

│ │холеры сухая (типа │ │ │область, │

│ │TCBS) │ │ │Серпуховский район, п. │

│ │ │ │ │Оболенск │

│ │ │ │ │Тел.: (4967) 36-00-09 │

│ │ │ │ │Тел./факс: (4967) 36-00-20│

│ │ │ │ │E-mail: info@obolensk.org │

│ │ │ │ │Веб-сайт: www.obolensk.org│

│ 29 │Набор реагентов для │ │ │ -"- │

│ │иммунохроматографичес- │ │ │ │

│ │кой идентификации │ │ │ │

│ │микробных клеток │ │ │ │

│ │возбудителя холеры (ИХ │ │ │ │

│ │тест-полоска V. │ │ │ │

│ │cholerae O1) │ │ │ │

│ 30 │Иммунохроматографичес- │ │ │ -"- │

│ │кая тест-система для │ │ │ │

│ │экспресс-выявления и │ │ │ │

│ │идентификации │ │ │ │

│ │возбудителя холеры (ИХ │ │ │ │

│ │тест-система V. │ │ │ │

│ │cholerae O139) │ │ │ │

│ 31 │Иммунохроматографичес- │ │ │ -"- │

│ │кая тест-система для │ │ │ │

│ │экспресс-выявления и │ │ │ │

│ │идентификации │ │ │ │

│ │возбудителя холеры (ИХ │ │ │ │

│ │тест-система V. │ │ │ │

│ │cholerae Инаба) │ │ │ │

│ 32 │Иммунохроматографи- │ │ │ -"- │

│ │ческая тест-система │ │ │ │

│ │для экспресс-выявления │ │ │ │

│ │и идентификации │ │ │ │

│ │возбудителя холеры (ИХ │ │ │ │

│ │тест-система V. │ │ │ │

│ │cholerae Огава) │ │ │ │

│ 33 │Набор реагентов для │ │ТУ 9398-058-01897593-2010 │ФГУЗ РосНИПЧИ "Микроб" │

│ │выявления ДНК Vibrio │ │ │410005, г. Саратов, ул. │

│ │cholerae и │ │ │Университетская, д. 46 │

│ │идентификации │ │ │Тел.: (8452) 26-21-31 │

│ │патогенных штаммов │ │ │Факс: (8452) 51-52-12 │

│ │Vibrio cholerae в │ │ │E-mail: microbe@san.ru │

│ │биологическом материале│ │ │Веб-сайт: www.microbe.ru │

│ │и объектах окружающей │ │ │ФГУН ЦНИИ эпидемиологии, │

│ │среды методом │ │ │ООО "Интерлабсервис" │

│ │полимеразной цепной │ │ │119021, г. Москва, │

│ │реакции (ПЦР) с │ │ │Олсуфьевский переулок, д. │

│ │гибридизационно- │ │ │8, стр. 1 │

│ │флуоресцентной │ │ │Тел.: (495) 664-28-84 │

│ │детекцией "АмплиСенс │ │ │Факс: (495) 6642889 │

│ │Vibrio cholerae - FL" │ │ │E-mail: │

│ │ │ │ │info@interlabservice.ru │

│ │ │ │ │Веб-сайт: │

│ │ │ │ │www.interlabservice.ru │

│ 34 │Набор реагентов для │ │ │ФГУЗ РосНИПЧИ "Микроб" │

│ │выявления и ускоренной │ │ │410005, г. Саратов, ул. │

│ │идентификации Vibrio │ │ │Университетская, д. 46 │

│ │cholerae методом │ │ │Тел.: (8452) 26-21-31 │

│ │полимеразной цепной │ │ │Факс: (8452) 51-52-12 │

│ │реакции с │ │ │E-mail: microbe@san.ru │

│ │электрофоретическим │ │ │Веб-сайт: www.microbe.ru │

│ │учетом результатов "Ген│ │ │ │

│ │Vibrio cholera - │ │ │ │

│ │идентификация - РЭФ" │ │ │ │

│ 35 │Иммуноферментная тест- │ │ │ -"- │

│ │система для определения│ │ │ │

│ │токсигенных штаммов │ │ │ │

│ │холерного вибриона │ │ │ │

│ 36 │Диагностикум │ │ │ФГУЗ "РостНИПЧИ" │

│ │антилипазный │ │ │344002, г. Ростов-на- │

│ │иммуноглобулиновый │ │ │Дону, ул. Горького, 117 │

│ │полимерный сухой для │ │ │т. (863) 240-27-03 │

│ │выявления │ │ │т/ф (863) 234-13-76 │

│ │гемолитических штаммов │ │ │plage@ic.ru │

│ │холерных вибрионов │ │ │ │

│ 37 │Иммуноглобулины │ │ │ -"- │

│ │диагностические │ │ │ │

│ │холерные моноклональные│ │ │ │

│ │сухие для выявления │ │ │ │

│ │холерных вибрионов O1 и│ │ │ │

│ │O139 серогрупп │ │ │ │

│ 38 │Питательная среда для │ │ │ -"- │

│ │выделения холерного │ │ │ │

│ │вибриона элективно- │ │ │ │

│ │дифференциальная сухая │ │ │ │

│ │(СЭДХ) │ │ │ │

│ 39 │Жидкая питательная │ │ │ -"- │

│ │среда для │ │ │ │

│ │культивирования │ │ │ │

│ │холерного вибриона - │ │ │ │

│ │ХДС-бульон на основе │ │ │ │

│ │панкреатического │ │ │ │

│ │перевара пекарских │ │ │ │

│ │дрожжей (ПППД) │ │ │ │

│ 40 │Питательная среда для │ │ │ -"- │

│ │культивирования │ │ │ │

│ │холерного вибриона-ХДС-│ │ │ │

│ │агар (ПППД) │ │ │ │

│ 41 │Жидкая питательная │ │ │ -"- │

│ │среда холерная │ │ │ │

│ │накопительная (ХДС-Н) │ │ │ │

│ 42 │Сыворотки │ │ │ФГУЗ ИркутскНИПЧИ │

│ │диагностические │ │ │664047, г. Иркутск, ул. │

│ │холерные Огава и Инаба │ │ │Трилиссера, 78 │

│ │адсорбированные сухие │ │ │Тел./факс: (3952) 22-01-35│

│ │для реакции │ │ │E-mail: │

│ │агглютинации (РА) │ │ │adm@chumin.irkutsk.ru │

│ │ │ │ │Веб-сайт: │

│ │ │ │ │www.irkutsk.ru/chumin/ │

│ 43 │Сыворотка │ │ │ -"- │

│ │диагностическая │ │ │ │

│ │холерная O1 │ │ │ │

│ │адсорбированная и │ │ │ │

│ │неадсорбированная сухая│ │ │ │

│ │для реакции │ │ │ │

│ │агглютинации (РА) │ │ │ │

│ 44 │Питательная среда для │ │ │ -"- │

│ │выделения и │ │ │ │

│ │культивирования │ │ │ │

│ │холерного вибриона │ │ │ │

│ │(щелочной агар) сухая │ │ │ │

│ 45 │Тест-система для │ │ │ФГУ │

│ │выявления ДНК Vibrio │ │ │"48 ЦНИИ МО РФ", г. Киров │

│ │ + │ │ │ │

│ │cholerae (ctxA и │ │ │ │

│ │ + │ │ │ │

│ │tcpA ) методом ПЦР │ │ │ │

└─────┴───────────────────────┴────────────────┴────────────────────────────┴──────────────────────────┘

N п/п	Перечень бактериологических лабораторий с учетом уровней	Уровни подготовки
		профессиональная переподготовка в противочумных учреждениях (не менее 500 ч)		повышение квалификации по ООИ (72-500 ч)		другие виды подготовки (семинары по лабораторной диагностике холеры)		рабочие места в лаборатории или отделе особо опасных инфекций
		врачи	лаборанты	врачи	лаборанты	врачи	лаборанты	врачи	лаборанты
Территориальный уровень
1	ЛПУ	-	-	+/-	+/-	+	+	+	+
2	Филиалы ФБУЗ ЦГиЭ	-	-	+/-	+/-	+	+	+	+
3	ФБУЗ ЦГиЭ без лаборатории ООЧ	-	-	+/-	+/-	+	+	+	+
4	ФБУЗ ЦГиЭ с лабораториями ООЧ	+	+	+	+	+/-	+/-	-	-
Региональный уровень
5	Региональные центры по мониторингу II - IV групп патогенности	+	+	+	+	+/-	+/-	-	-
6	Региональные центры по мониторингу I - II групп патогенности	+	+	+	+	+/-	+/-	-	-
7	Центры индикации и диагностики	+	+	+	+	+/-	+/-	-	-
Федеральный уровень
8	Референс-центр по мониторингу за холерой	+	+	+	+	+/-	+/-	-	-
9	Национальный Центр верификации	+	+	+	+	+/-	+/-	-	-
"+" Обязательный уровень подготовки. "-" Подготовка для такого уровня не требуется. "+/-" Подготовка для такого уровня рекомендуется.