|
Номер смеси для
градуировки |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|
Хлороформ, объем
исходной |
0,25 |
1,0 |
2,0 |
5,0 |
10,0 |
15,0 |
|
Содержание
хлороформа, |
0,0015 |
0,0060 |
0,0120 |
0,0300 |
0,0600 |
0,0890 |
|
Тетрахлорметан, объем |
0,25 |
1,0 |
2,0 |
5,0 |
10,0 |
15,0 |
|
Содержание тетрахлорметана, |
0,0004 |
0,0016 |
0,0030 |
0,0080 |
0,0160 |
0,0240 |
|
1,2-Дихлорэтан,
объем |
0,5 |
1,0 |
2,0 |
5,0 |
10,0 |
15,0 |
|
Содержание
1,2-дихлорэтана, |
0,0125 |
0,0250 |
0,0500 |
0,1250 |
0,2500 |
0,3700 |
Во флаконы из-под пенициллина помещают по
5 куб. см мочи с аттестованной смесью, флаконы закрывают резиновой пробкой и
ставят в металлические цилиндры с просверленными в стенках отверстиями и
навинчивающейся крышкой (рис. 1 - не приводится). Первый цилиндр с флаконом
погружают в кипящую водяную баню. По истечении 5 мин. отбирают нагретым в
термостате при t = 60 град. С шприцем из флакона 5
куб. см парогазовой пробы и вводят ее в хроматографическую
колонку через испаритель. Процедуру повторяют аналогично для каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях:
температура термостата колонок - 90 град.
С;
температура испарителя - 170 град. С;
температура детектора - 250 град. С;
расход газа-носителя (азота) - 30 куб.
см/мин.;
скорость диаграммной ленты - 240 мм/ч;
время удерживания хлороформа - 3 мин. 05 с;
тетрахлорметана - 4 мин. 20 с;
1,2-дихлорэтана - 5 мин. 30 с.
На полученной хроматограмме
определяют площади пиков определяемых компонентов и по средним результатам из 6
серий строят градуировочную характеристику.
Градуировку проверяют 1 раз в квартал и при смене партии реактивов.
7.5. Отбор проб
Отбор проб мочи в объеме не менее 200
куб. см производится в тщательно вымытый стеклянный сосуд с притертой пробкой.
Анализ мочи проводить сразу или хранить в холодильнике не более 12 ч после
отбора пробы.
8. Выполнение
измерений
В два флакона из-под пенициллина помещают
по 5 куб. см мочи, флаконы закрывают резиновой пробкой и ставят в металлические
цилиндры с просверленными в стенках отверстиями и навинчивающейся крышкой.
Первый цилиндр с флаконом погружают в кипящую водяную баню. По истечении 5 мин.
отбирают нагретым в термостате при t = 60 град. С
шприцем из флакона 5 куб. см парогазовой пробы и вводят ее в хроматографическую колонку через испаритель. Процедуру
повторяют аналогично для второго образца и проводят выполнение измерений двух
параллельных проб мочи. Условия выполнения измерений аналогичны условиям при
установлении градуировочной характеристики (п. 7.4.).
9. Вычисление
результатов измерений
На хроматограмме рассчитывают площадь пика и по градуировочной
характеристике определяют концентрацию алифатических хлорированных
углеводородов в моче. За результат измерения принимают среднее
арифметическое значение двух параллельных определений X , X ,
max min
расхождение между которыми не должно превышать значения предела
повторяемости r (табл. 3).
n
_
Результат измерений представляют в виде ( X +/- ДЕЛЬТА) мкг/куб. см,
X + X
_ _ max min
где X - средний результат измерений, мкг/куб. см, X = -----------,
2
r X + X
n max min
при условии: X - X <= --- х -----------,
max min 100 2
где:
X - максимальный результат из 2-х параллельных измерений;
max
X - минимальный результат их 2-х параллельных измерений;
min
r - значение предела повторяемости, %;
n
ДЕЛЬТА - характеристика погрешности, мкг/куб. см, при Р = 0,95, равная:
_
дельта х X
ДЕЛЬТА = ----------, где дельта - относительное значение характеристики
100
погрешности, %.
10. Внутренний
контроль качества результатов измерений
Внутренний контроль качества (ВКК)
результатов измерений - повторяемость, внутрилабораторная
прецизионность (воспроизводимость),
точность - осуществляют с целью получения оперативной информации о качестве
измерений и принятия при необходимости оперативных мер по его повышению в
соответствии с нормативным документом МИ 2335-2003 "ГСОЕИ. Внутренний
контроль качества результатов количественного химического анализа".
Методика выполнения измерений обеспечивает получение результатов измерений с
погрешностью, не превышающей значений, приведенных в табл. 2 и 3.
Таблица 2
ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ, ЗНАЧЕНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ
ТОЧНОСТИ,
ПОВТОРЯЕМОСТИ, ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ
┌───────────────┬────────────────────┬────────────────────┬───────────────┐
│ Наименование │ Показатель │ Показатель │ Показатель │
│ определяемого │ повторяемости │ воспроизводимости │ точности │
│ компонента и │ (относительное │ (относительное │ (границы │
│ диапазон │среднеквадратическое│среднеквадратическое│ относительной │
│ измерений, │ отклонение │ отклонение │ погрешности │
│ мкг/куб. см │ повторяемости), │воспроизводимости), │при вероятности│
│ │ сигма , % │ сигма , % │ Р = 0,95), │
│ │ r │ R │ +/- дельта, % │
│ │ │ _ │ │
│ │ │ Xl │ │
├───────────────┼────────────────────┼────────────────────┼───────────────┤
│Хлороформ, │ 11,6 │ 12,7 │ 28,3 │
│от 0,0015 │ │ │ │
│до 0,09 │ │ │ │
├───────────────┼────────────────────┼────────────────────┼───────────────┤
│Тетрахлорметан,│ 11,4 │ 15,2 │ 15,6 │
│от 0,0004 │ │ │ │
│до 0,03 │ │ │ │
├───────────────┼────────────────────┼────────────────────┼───────────────┤
│1,2-Дихлорэтан,│ 10,6 │ 13,9 │ 9,1 │
│от 0,0125 │ │ │ │
│до 0,37 │ │ │ │
└───────────────┴────────────────────┴────────────────────┴───────────────┘
Таблица 3
ЗНАЧЕНИЯ ПРЕДЕЛОВ ПОВТОРЯЕМОСТИ И
ВОСПРОИЗВОДИМОСТИ
ПРИ ДОВЕРИТЕЛЬНОЙ ВЕРОЯТНОСТИ Р
= 0,95
┌────────────────┬──────────────────────────┬─────────────────────────────┐
│ Наименование │ Предел повторяемости │ Предел внутрилабораторной │
│ определяемого │ (относительное │ воспроизводимости │
│ компонента и │ значение допускаемого │ (относительное значение │
│ диапазон │ расхождения между │ допускаемого расхождения │
│ измерений, │ двумя результатами │ между двумя результатами │
│ мкг/куб. см │параллельных определений),│измерений,полученными в одной│
│ │ r , % │ лаборатории, но в разных │
│ │ n │ условиях), R , % │
│ │ │ _ │
│ │ │ Xl │
├────────────────┼──────────────────────────┼─────────────────────────────┤
│Хлороформ, │ 32,1 │ 35,1 │
│от 0,0015 │ │ │
│до 0,09 вкл. │ │ │
├────────────────┼──────────────────────────┼─────────────────────────────┤
│Тетрахлорметан, │ 21,6 │ 24,4 │
│от 0,0004 │ │ │
│до 0,03 вкл. │ │ │
├────────────────┼──────────────────────────┼─────────────────────────────┤
│1,2-Дихлорэтан, │ 19,3 │ 21,1 │
│от 0,0125 │ │ │
│до 0,37 вкл. │ │ │
└────────────────┴──────────────────────────┴─────────────────────────────┘
10.1. Контроль
стабильности градуировочной характеристики
Контроль стабильности градуировочной
характеристики проводят раз в квартал в анализируемой серии измерений.
Определяют содержание исследуемых соединений в градуировочных
растворах, которые соответствуют началу, середине и концу градуировочного
интервала. Градуировка признается стабильной, если расхождение между заданными
и измеренными значениями концентраций не превышает 5%.
10.2. Контроль
повторяемости
Относительное расхождение между результатами двух измерений,
выполненных в соответствии с методикой одним оператором при измерении
образцов одной и той же рабочей пробы с использованием одних и тех же
средств измерений и реактивов в течение возможно минимального интервала
времени, не должно превышать значения предела повторяемости r (табл. 3).
n
Повторяемость результатов параллельных измерений признают
удовлетворительной, если:
r X + X
n
max min
X - X
<= --- х
-----------,
max min 100 2
где:
r - значение предела повторяемости, %;
n
X - максимальный результат из 2-х параллельных измерений;
max
X - минимальный результат их 2-х параллельных измерений.
min
Если условие не выполняется, эксперимент
повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины,
приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.
10.3. Контроль воспроизводимости
Внутренний контроль качества воспроизводимости проводят с использованием рабочей пробы.
Пробу делят на две равные части и анализируют в соответствии с методикой,
максимально варьируя условия проведения анализа (разные операторы, разное
время, разные партии реактивов одного типа, разные наборы мерной посуды и
т.д.). Воспроизводимость результатов контрольных
измерений признают удовлетворительной, если выполняется условие:
R
_ _ _
Xl X + X
_ _ 1 2
|X - X | <= --- х -------,
1 2 100 2
где:
_
Х - средний результат анализа рабочей пробы из 2-х параллельных
1
измерений, мкг/куб. см;
_
Х - средний результат анализа рабочей пробы из 2-х параллельных
2
измерений, полученный в других условиях, мкг/куб. см;
R - значение предела внутрилабораторной воспроизводимости, % (табл 3).
_
Xl
_ _
Расхождение между результатами измерений Х и Х , полученных в разных
1 2
условиях, не должно превышать значений показателя воспроизводимости R при
_
Xl
доверительной вероятности Р = 0,95, указанных в табл. 3.
Если условие не выполняется, эксперимент
повторяют. При повторном получении отрицательного результата выясняют причины,
приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.
10.4. Контроль
точности
Контроль точности с использованием метода добавок состоит в сравнении
результата контрольной процедуры, равного разности между результатом
контрольного измерения содержания алифатических хлорированных соединений
(хлороформ, тетрахлорметан, 1,2-дихлорэтан) в пробе с известной добавкой
_1 _
(X ), в рабочей пробе без добавки (X) и величиной добавки С (добавка
д
должна составлять не менее 40% от содержания алифатических хлорированных
соединений в рабочей пробе) с нормативом точности К.
Результаты контроля признаются удовлетворительными, если выполняется условие:
_1 _
|X - X - С | = K ,
д k
где:
_1
X - средний результат контрольного измерения содержания определяемого
компонента в рабочей пробе с известной добавкой из 2-х параллельных
измерений, мкг/куб. см;
_
X - средний результат контрольного измерения содержания определяемого
компонента в рабочей пробе из 2-х параллельных измерений, мкг/куб. см;
С - величина добавки к пробе, мкг/куб. см;
д
_______________________________
/ дельта _ 2 дельта _1 2
K = 0,84 х / (------ х X) + (------ х X ) .
\/ 100 100
Качество контрольной процедуры признают удовлетворительным при
выполнении условия: K <= K.
k
При превышении норматива контроля К эксперимент повторяют. При повторном превышении
указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным
результатам контроля, и устраняют их.
Периодичность ВКК регламентируют в
руководстве по качеству лаборатории.
Литература
1. Бандман
А.Л., Войтенко Г.А., Волкова Н.В. и др. Вредные химические вещества.
Углеводороды. Галогенпроизводные углеводородов: Справ. изд./Под ред. В.А.Филова
и др. Л.: "Химия", 1990.
Методические указания разработаны
Пермским научно-исследовательским клиническим институтом детской экопатологии (Т.С.Уланова, Т.В.Нурисламова, Г.И.Леготкина, Н.А.Попова).